日本人に頻度が高いHLA-A2サブタイプに提示されるメラノーマ抗原の同定

鉴定日本人中常见的 HLA-A2 亚型呈递的黑色素瘤抗原

基本信息

批准号：
14770397
负责人：
猪爪隆史
金额：
$ 2.11万
依托单位：
University of Yamanashi (2003)山梨医科大学 (2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770397/
关键词：
メラノーマ日本人 HLA-A2 ペプチド gP100 CTL 免疫療法 gp100

项目摘要

1 HLA-Aサブタイプ間におけるペプチドの交叉反応性の検討腫瘍浸潤リンパ球から樹立したHLA-A^*0201拘束性MART-1あるいはgp100特異的メラノーマ反応性CTLが、対応するT細胞エピトープペプチドで感作したHLA-A^*0206あるいはHLA-A^*0207陽性EBV-B細胞を認識するかどうかをT細胞からのIFN-γ分泌アッセイにて検討した。その結果gp100-209特異的CTLであるTIL1520は、gp100-209で感作したHLA-A^*0206およびHLA-A^*0207陽性EBV-B細胞を認識し、gp100-280特異的T細胞クローンを含むTIL660はgp100-280感作HLA-A^*0206陽性EBV-B細胞を認識した。またTIL1520とTIL660はHLA-A^*0206遺伝子を導入したメラノーマ細胞も認識した。したがって、gp100-209とgp100-280は、検討したHLAサブタイプ間で交叉反応性をもち、しかも、メラノーマ細胞において、内因性にプロセスされてT細胞に認識されることが示された。したがって、これらのペプチドは、HLA-A^*0206やHLA-A^*0207患者においても、使用できる可能性がある。2 HLA-A^*0206陽性健常人末梢血リンパ球からのCTL誘導上記により、HLA-A^*0201結合性gp100ペプチドは、HLA-A^*0206あるいはHLA-A^*0207にも内因性にプロセスされることが示唆されたので、次に、HLA-A^*0206陽性健常人リンパ球から、実際にペプチド特異的、メラノーマ反応性T細胞が誘導できるかどうかを検討した。HLA-A^*0206陽性健常人の末梢血リンパ球をgp100-154,-209,-280の3種類、それぞれのペプチドにて感作した刺激細胞を用いてin vitroにて4-6回刺激し、樹立したT細胞の抗原特異性を検討したところ、gp100-280刺激により、gp100-280感作HLA-A^*0206陽性EBV-B細胞、HLA-A^*0206とgp100遺伝子を同時導入発現させたCOS7細胞、HLA-A^*0206遺伝子導入メラノーマ細胞を認識するCTLが誘導できた。

1检查 HLA-A 亚型之间肽的交叉反应性 HLA-A^*0201 限制性 MART-1 或 gp100 特异性黑色素瘤反应性 CTL 是否用相应的 T 细胞表位肽进行刺激？生成的 HLA-A^*0206 或 HLA-A^*0207 阳性 EBV-B 细胞可以使用 T 细胞的 IFN-γ 分泌测定来识别。结果，从用gp100-209致敏的HLA-A^*0206-和HLA-A^*0207-阳性EBV中分离出TIL1520，gp100-209特异性CTL。 -TIL660，识别B细胞并含有gp100-280特异性T细胞克隆，识别gp100-280致敏的HLA-A^*0206阳性EBV-B细胞。 TIL1520和TIL660还识别已导入HLA-A^*0206基因的黑色素瘤细胞。因此，表明gp100-209和gp100-280在所检查的HLA亚型之间具有交叉反应性，并且它们被黑色素瘤细胞中的T细胞内源性加工和识别。因此，这些肽也可用于 HLA-A^*0206 和 HLA-A^*0207 患者。 2来自HLA-A^*0206阳性健康受试者的外周血淋巴细胞的CTL诱导如上所述，结合HLA-A^*0201的gp100肽是HLA-A^*0206或HLA-A^*0207。因此，我们接下来研究了肽特异性、黑色素瘤反应性 T 细胞是否真的可以从 HLA-A^*0206 阳性健康淋巴细胞中诱导出来。使用用三种类型的肽致敏的刺激细胞注射HLA-A^*0206阳性健康个体的外周血淋巴细胞：gp100-154、-209和-280。当我们检查体外刺激4-6次建立的T细胞的抗原特异性时，我们发现gp100-280刺激导致gp100-280致敏HLA-A^*0206阳性EBV-B细胞，HLA-A^我们能够诱导识别共转染 *0206 和 gp100 基因的 COS7 细胞以及转染 HLA-A^*0206 基因的黑色素瘤细胞的 CTL。