ウイルス様粒子(VLPs)を用いたノロウイルスの浄水処理性の評価

使用病毒样颗粒（VLP）评估诺如病毒的水净化特性

基本信息

批准号：
09J00359
负责人：
白崎伸隆
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

水系感染症を引き起こす病原性ウイルスの中でも,感染事例が世界中で増加しているヒトノロウイルスは,未だ効率的な培養法が確立されていないことから,添加実験による浄水処理性の評価を行うために必要なウイルス量を確保することが極めて困難であり,培養可能な病原性ウイルスと比べて研究が格段に遅れている.そこで,本研究では,ヒトノロウイルスの物理的な浄水処理性を,遺伝子組換えバキュロウイルスとカイコを用いたタンパク質発現法により発現させたヒトノロウイルス外套タンパク粒子(VLPs)を用いて評価することを目的とした.本年度は,凝集沈澱-MF膜ろ過処理におけるVLPsの処理性を調べた.凝集沈澱-MF膜ろ過処理においては,凝集剤としてPACIを用いた場合,4log以上のVLPsの除去率が得られた.従って,凝集沈澱-MF膜ろ過処理を用いることにより,米国環境保護局の要求する4logの腸管系ウイルスの除去率を達成し得ることが示唆された.一方,凝集剤としてalumを用いた場合,VLPsの除去率は約3logとなり,PACIを用いた場合の除去率よりも低くなった.従って,凝集沈澱-MF膜ろ過処理においては,PACIを用いることにより,alumを用いる場合に比べて効果的にVLPsを除去できることが分かった.加えて,VLPsと大腸菌ファージQβおよびMS2の処理性を比較したところ,いずれの凝集剤を用いた場合でも,QβおよびMS2の除去率は,VLPsの除去率よりも低くなった.従って,凝集沈澱-MF膜ろ過処理においては,Qβ,MS2共にヒトノロウイルスの安全側の指標と成り得る可能性が示された.

在引起水传播感染的病原病毒中，人类诺如病毒的感染病例在全球范围内不断增加，但目前还没有有效的培养方法，因此我们进行了添加剂实验来评估其水净化性能，这是极其困难的。人类诺如病毒所需的病毒数量，与可培养的致病病毒相比，研究远远落后。本研究的目的是评估使用重组杆状病毒表达的人诺如病毒套蛋白颗粒 (VLP) 和使用蚕的蛋白表达方法，我们研究了 PACI 时 VLP 的可加工性。使用作为絮凝剂时，获得了4log以上的VLPs去除率。这些结果表明，通过使用混凝-沉淀-MF膜过滤，可以达到美国环境保护署要求的4-log肠道病毒去除率。另一方面，当使用明矾作为混凝剂时， VLPs的去除率约为3 log，低于使用PACI时的去除率。因此，在混凝沉淀-MF膜过滤处理中，使用PACI时，可以使用明矾。另外，当我们比较VLPs与大肠杆菌噬菌体Qβ和MS2的可处理性时，我们发现无论使用哪种絮凝剂，Qβ和MS2的去除率均明显低于VLPs的去除率。在混凝-沉淀-MF膜过滤处理中，结果表明Qβ和MS2均可作为人诺如病毒的安全指标。