小脳に特異的に発現する膜型マトリックスメタロプロテアーゼの機能解析

小脑特异性表达的膜型基质金属蛋白酶的功能分析

• 批准号: 12670195
• 负责人: 岡田 明子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12670195/
• 关键词: 模型マトリックスメタロプロテアーゼ; ノックアウトマウス; ジーンターゲティング; 生理的機能; MT5-MMP

MT-MMP遺伝子は、現在までに6種類の分子(MT1,2,3,4,5,6-MMPs)が報告されている。本研究ではMT5-MMPに的を絞って主としてジーンターゲティングの手法を用いて解析するとともに、マウス個体発生における発現を検討し、MT-MMPの生物学的機能解析を目指す。MT5-MMP遺伝子は成体では主に小脳に発現し、脳の発生においては、分裂を終えた神経細胞に発現していることがin situ hybridization,免疫組織化学の手法を用い同定された。MT5-MMPはP19細胞において、レチノイン酸でその発現が誘導され、さらにAraCで処理した神経細胞に分化した細胞に発現がみられた。また、MT5-MMPは脳に存在するプロテオグリカンを分解することより、MT5-MMPは神経線維の伸長に関与することが示唆された。しかしながら、MT5-MMPのノックアウトマウスのホモロマウスが得られたものの、著明な異常所見は生後約1年生存しているが、今のところ得られていない。MT5-MMPのほかに、MT3-MMP、MT4-MMPも脳での発現が認められる。しかしながら、その発現場所時期に違いが認められ、それぞれ異なる機能をもつと考えられる。

迄今为止已报道了六种类型的 MT-MMP 基因（MT1、2、3、4、5、6-MMP）。本研究主要采用基因打靶方法分析MT5-MMP，检测其在小鼠个体发育过程中的表达，旨在分析MT-MMP的生物学功能。使用原位杂交和免疫组织化学技术发现MT5-MMP基因主要在成人小脑以及大脑发育过程中的分裂后神经元中表达。视黄酸在 P19 细胞中诱导 MT5-MMP 的表达，并在用 AraC 处理的分化为神经元的细胞中观察到进一步的表达。此外，MT5-MMP 会降解大脑中存在的蛋白聚糖，表明 MT5-MMP 参与神经纤维伸长。然而，虽然已经获得了同源MT5-MMP敲除小鼠，但迄今为止尚未观察到明显的异常发现，尽管它们在出生后存活了大约一年。除了MT5-MMP之外，还观察到MT3-MMP和MT4-MMP在大脑中表达。然而，它们表达的位置和时间存在差异，并且被认为具有不同的功能。