WRNヘリケース遺伝子ファミリーの機能異常による発癌機構の解析

WRN解旋酶基因家族功能异常致癌机制分析

基本信息

批准号：
12213014
负责人：
菅原稔
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ウェルナーヘリケース遺伝子ファミリーは、現在少なくともヒトでは5種類以上のメンバー(RecQ1,BLM,WRN,RecQ4,RecQ5)から成ることが知られているが、生体内における機能・役割分担はいずれも不明である。我々はこれら遺伝子ファミリーの機能異常と老化・発癌機構との関連を明らかにするため、ジーンターゲッティング法により各ノックアウトマウスを樹立し詳細な解析を行ってきた。以下にこれまで得られた知見及び今後の課題を要約する。これまでの経過観察では、ウェルナーホモ変異マウスは、ほぼメンデル則に従って得られ、野生型やヘテロ変異マウスと比較して外見上の差は認められずほぼ正常に生まれてきた。その後の成長及び生存日数にも顕著な差は認められず、生後52週齢までに白内障や腫瘍形成は認められなかった。病理解剖解析の結果、各臓器における変化はマイルドなものが多かった。比較的顕著な変化としてホモ変異個体では、13週齢以後雌の卵巣萎縮が認められたが、雄の生殖腺では、40週齢を経過しても特に異常は認められなかった。また26週齢の雄の唾液腺では、消化酵素やフェロモン物質などを貯留している上皮分泌顆粒の減少が観察された。40週齢を経過すると、関節の滑膜内皮細胞の増殖や滑膜の線維化が観察された。しかしこれらの変化は患者の臨床像と比べ明らかに軽微であった。現在、トランスジェニックマウスgpt deltと交配させることにより、突然変異誘発頻度の測定を試みている。一方、ロスモンド・トムソン症候群の原因遺伝子であるRecQ4ノックアウトマウスは、F1ヘテロ変異マウス同士の交配により生まれたF2マウスにはホモ変異マウスが存在せず、胎生致死であることが推察された。また、RecQ1ではホモ変異マウスがメンデル則に従って得られ、RecQ5については、現在キメラマウスまで得られており、詳細な解析は今後の課題である。

目前已知人类中的维尔纳解旋酶基因家族至少由五个成员（RecQ1、BLM、WRN、RecQ4、RecQ5）组成，但它们在体内的功能和作用尚不清楚。为了阐明这些基因家族的功能异常与衰老和致癌机制之间的关系，我们利用基因打靶方法建立了基因敲除小鼠并进行了详细分析。迄今为止所获得的知识和未来的挑战总结如下。在迄今为止的后续观察中，Werner纯合突变小鼠几乎按照孟德尔规则获得，并且出生时几乎正常，与野生型或杂合突变小鼠相比，外观没有明显差异。随后的生长或存活没有显着差异，并且到 52 周龄时没有观察到白内障或肿瘤形成。病理尸检分析结果显示，各器官的变化大多较轻微。作为比较显着的变化，纯合突变体在13周龄后观察到雌性卵巢萎缩，但即使在40周龄后，雄性性腺也没有观察到特别的异常。此外，在26周龄男性的唾液腺中，观察到储存消化酶和信息素物质的上皮分泌颗粒减少。 40周龄后观察到关节内滑膜内皮细胞增殖和滑膜纤维化。然而，与患者的临床情况相比，这些变化显然很小。我们目前正在尝试通过将转基因小鼠与 gpt delt 杂交来测量诱变的频率。另一方面，RecQ4 基因敲除小鼠（Rossmond-Thomson 综合征的致病基因）被认为具有胚胎致死性，因为 F1 杂合突变小鼠交配不会产生纯合 F2 小鼠。此外，对于RecQ1，根据孟德尔规则获得纯合突变小鼠，对于RecQ5，目前已经获得嵌合小鼠，详细分析是未来的课题。