E-カドヘリンプロセス分子のNaked DNAを用いた口腔癌の遺伝子治療法の開発

使用E-钙粘蛋白过程分子的裸DNA开发口腔癌基因治疗

• 批准号: 20659315
• 负责人: 林堂 安貴
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659315/
• 关键词: 口腔癌; 浸潤・転移; E-カドヘリン; プラスミノーゲン; プラスミン; プロセシング; 細胞凝集能; 細胞遊走能

これまでに,プラスミンが,細胞間接着分子のE-カドヘリンを細胞間接着活性部位が存在する細胞外ドメインで切断することで,細胞間接着を抑制し細胞凝集能を低下させ,扁平上皮癌の細胞遊走を亢進していることを見いだし,プラスミノーゲン/プラスミン系がE-カドヘリンの重要なプロセシング調節因子であることをしていることを明らかにしてきた.これらの知見から,プラスミノーゲン/プラスミン系を抑制することで,扁平上皮癌の浸潤・転移を阻止することが期待された.本研究では,扁平上皮癌細胞のプラスミノーゲン/プラスミン系抑制するため,ヒト肝臓のmRNA(American Type Culture Collectionより購入)より,RT-PCRにてプラスミノーゲン/プラスミン系阻害分子であるα2-アンチプラスミン遺伝子のopen reading frameを増幅し,α2-アンチプラスミンcDNAが組み込まれた哺乳細胞発現プラスミドベクターを構築した.このプラスミドを扁平上皮癌細胞に導入し,細胞の凝集能,増殖能及び細胞遊走能に与える影響をin vitroにて検索するとともに,in vivoでの増殖能を解析し,以下の結果を得た.α2-アンチプラスミン遺伝子導入は,プラスミノーゲン/プラスミン系による扁平上皮癌細胞のE-カドヘリンのプロセシングを抑制し,扁平上皮癌細胞の細胞凝集能を亢進させた.α2-アンチプラスミン遺伝子を導入した扁平上皮癌細胞は,コラーゲンゲルへの浸潤能が低下するとともに,ヌードマウスでの造腫瘍能が低下した.

前期研究表明，纤溶酶在细胞间粘附活性位点存在的细胞外域裂解细胞间粘附分子E-钙粘蛋白，从而抑制细胞间粘附，降低细胞聚集能力，从而抑制鳞状细胞癌，从而增强细胞迁移能力。纤溶酶原/纤溶酶系统在E-钙粘蛋白的加工中起着重要作用。根据这些发现，预计抑制纤溶酶原/纤溶酶系统将抑制鳞状细胞癌的侵袭和转移。 α2-抗纤溶酶基因（纤溶酶原/纤溶酶系统抑制分子）的开放阅读框通过RT-PCR从典型培养物保藏中心扩增，并且整合了α2-抗纤溶酶cDNA的哺乳动物细胞表达质粒载体。将其引入鳞状细胞癌细胞中，并在体外研究其对细胞聚集、增殖和迁移能力的影响。我们分析了体内增殖能力并获得以下结果：α2-抗纤溶酶基因导入抑制鳞状细胞癌细胞中纤溶酶原/纤溶酶系统对E-钙粘蛋白的加工，并且细胞聚集能力增强。引入α2-抗纤溶酶基因后，裸鼠侵入胶原凝胶和形成肿瘤的能力下降。

项目成果

口腔外科学 (第3版)

口腔外科（第三版）

• 发表时间: 2010
• 作者: 林堂安貴;他 (白砂兼光;古郷幹彦 編)
• 通讯作者: 古郷幹彦 編)

Heparin promotes the growth of human embryonic stem cells in a define serum-free medium

肝素促进人胚胎干细胞在限定的无血清培养基中生长

• 发表时间: 2008
• 期刊: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105(36)
• 作者: Furue;M. K.;Okamoto;T;et al
• 通讯作者: et al

オトガイ部知覚異常を初発症状とした側頭下窩に進展した筋肉内脂肪腫の1例

以精神区感觉异常为首发症状的肌内脂肪瘤扩散至颞下窝一例

• 发表时间: 2009
• 期刊: 日本口腔外科学会雑誌 55
• 作者: 福井康人;林堂安貴;他
• 通讯作者: 他