セリンプロテアーゼ阻害剤を用いた口腔癌転移に対する薬物療法

使用丝氨酸蛋白酶抑制剂治疗口腔癌转移

• 批准号: 11877351
• 负责人: 林堂 安貴
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877351/
• 关键词: がん浸潤・転移; プラスミノゲンアクチベーター; プラスミン; α2アンチプラスミン; 口腔癌浸潤; プラスミノーゲンアクチベーター; α2-アンチプラスミン

これまでの研究により,口腔癌細胞は高いウロキナーゼ型プラスミノーゲシアクチベーター(uPA)産生能を有し,細胞膜上でプラスミノーゲンをプラスミンに活性化し,線維芽細胞などの間質細胞の産生した細胞外基質蛋白を分解していることが明らかとなった.口腔癌細胞に線維芽細胞培養上清添加して培養すると,線維芽細胞培養上清中の不活性型マトリックスメタロプロテアーゼ2(MMP-2)が活性化されることがわかった.この培養系にプラスミン阻害物質であるα2アンチプラスミンの中和抗体を添加すると,口腔癌細胞によるMMP-2活性化がさらに亢進することが示された.プラスミンはMMP-1やMMP-9などの他の蛋白分解酵素を活性化すること知られていたが,MMP-2の活性化には関与していないと考えられていた.今回の結果は,プラスミンが自ら強い蛋白分解活性を示すほか,MMP-2の活性化し癌細胞の浸潤・転移を制御していることを示すものである.一方,各種培養細胞のα2アンチプラスミシのmRNA発現を検索すると,一部の肝癌細胞を除いては,今回検索した大部分の癌細胞にはα2-アンチプラスミン遺伝子発現がみられなかった.このことから現在,肝細胞由来RNAよりRT-PCRにてクローニングされたα2アンチプラスミン遺伝子を発現ベクターに組み込み口腔癌細胞に導入し,口腔癌細胞の蛋白分解活性や浸潤脳に与える影響についての検討を行っている.

此前的研究表明，口腔癌细胞具有很高的产生尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）的能力，它可以将细胞膜上的纤溶酶原激活为纤溶酶，并刺激成纤维细胞等间质细胞的产生，从而揭示细胞外基质。当添加成纤维细胞培养上清液培养口腔癌细胞时，成纤维细胞的蛋白质被降解。结果发现，当向该培养系统中添加中和α2抗纤溶酶（纤溶酶抑制剂）的抗体时，培养物上清液中的无活性基质金属蛋白酶2（MMP-2）被激活，口腔癌细胞纤溶酶会激活MMP-等其他蛋白水解酶。 1和MMP-9。尽管已知纤溶酶具有很强的蛋白水解活性，但不认为它参与MMP-2的激活，这表明它控制癌细胞的侵袭和转移。另一方面，在寻找mRNA时。检测各种培养细胞中α2抗浆蛋白的表达情况，发现排除了部分肝癌细胞。然而，在本次检索的大多数癌细胞中均未观察到α2-抗纤溶酶基因的表达。因此，我们目前使用从肝细胞来源的RNA中通过RT-PCR克隆的α2-抗纤溶酶基因作为我们正在将其整合到口腔癌细胞中，并检查口腔癌细胞的蛋白水解活性及其对浸润大脑的影响。

项目成果

FURUE,M.,et al.: "Effects of Hapatocyte Growth Factor(HGF)and Activin A on the Morphogenesis of Rat Submandibular Gland-devived Epithelial Cells in Serum-free Collagen Gel Culture."In Vitro Cellular&Developmental Biology. 35. 131-135 (1999)

FURUE,M.,et al.：“在无血清胶原凝胶培养中，肝细胞生长因子 (HGF) 和激活素 A 对大鼠下颌下腺来源的上皮细胞形态发生的影响”。

Furue,M. et al.: "Effect of Hepatocyte Growth Factor(HGF) and Activin A on the Morphogenesis of Rat Submandibular Gland-derived Cells in Serum-free Collagen Gel Culture."In Vitro Cellular & Developemental Biology. 35. 131-135 (1999)

古江，M.

Toratani,S. et al.: "Effect of Photodymnamic Action with Pheophorbite-A on Human Oral Carcinoma Cells in Serum-free Culture."Tissue Culture Research Communication. 18. 345-352 (1999)

虎谷，S.

TORATANI,S.,et al.: "Effect of photodynamic action with phephorbide-a on human oral carcinoma cells in serum-free culture"Tissue Culture Research Communications. 18. 345-352 (1999)

TORATANI,S.,et al.：“脱镁叶绿酸-a 的光动力作用对无血清培养物中人口腔癌细胞的影响”组织培养研究通讯。

Furue,M. et al.: "Effect of Transforming Growth Factor-β(TGF-β) on Morphogenesis in Rat salivary-derived RSMG-1 Cells."Tissue Culture Research Communication. 18. 339-343 (1999)

Furue, M. 等人：“转化生长因子-β (TGF-β) 对大鼠唾液来源的 RSMG-1 细胞形态发生的影响。组织培养研究通讯”18. 339-343 (1999)。