遺伝性脊髄小脳失調症の新しいポリグルタミン病遺伝子のクローニング

遗传性脊髓小脑共济失调新多聚谷氨酰胺疾病基因的克隆

基本信息

批准号：
12210051
负责人：
中村浩一郎
金额：
--
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝子未同定の遺伝性脊髄小脳変性症患者のリンパ球をポリグルタミン鎖を強く認識するモノクローナル抗体(1C2抗体)を用いてWestern blotを行い、新規ポリグルタミン蛋白の有無を検討し、1例のリンパ球から分子量約50kDaの新規のポリグルタミン蛋白を発見した。この50kDaの蛋白はTATA結合蛋白(TBP)に対する抗体と反応し、またPCRにてTBP遺伝子のCAG部分が伸長していたことから、新規のポリグルタミン蛋白と思われた。TBP遺伝子のCAGリピート数を当科遺伝子バンクの小脳症状、パーキンソニズム、舞踏病等の不随意運動を有する症例317例、健常者58例にて検討した。正常者のCAGリピート数は29-42であった。一方遺伝性神経疾患を持つ患者群からは43-55リピートを持つアレルが7家系11名に認められた。43リピート以上のアレルをもつ患者臨床像は比較的均一で、発症年齢(平均発症年齢31.8歳)とCAGリピート数は強い負の相関関係が認められ,神経症状は痴呆,小脳症状,錐体外路症状(パーキンソニズム,ジストニア、コレア),腱反射亢進であった。家系構成員のTATA結合蛋白遺伝子中のCAG/CAA多型を検討したところ、発症者は必ず病的アレルのheterozygoteであり、正常者は正常アレルのhomozygoteあるいはheterozygoteであったことから、遺伝形式は常染色体優性遺伝と結論した。剖検脳の免疫組織化学的検討では1C2抗体および抗ユビキチン抗体にて陽性の核内凝集体を認めた。以上の結果より、我々が見出した7家系は、ひとつの疾患単位を形成しており、ポリグルタミン病の範疇に入るものと考えた。

使用强烈识别多聚谷氨酰胺链的单克隆抗体（1C2抗体）对来自基因未鉴定的脊髓小脑变性患者的淋巴细胞进行蛋白质印迹，并检查了新型多聚谷氨酰胺蛋白的存在或不存在，我们发现了一种分子量为的新多聚谷氨酰胺蛋白。距球体约 50 kDa。这种50kDa的蛋白与抗TATA结合蛋白(TBP)的抗体发生反应，PCR显示TBP基因的CAG部分被延伸，因此它被认为是一种新型的聚谷氨酰胺蛋白。对本科基因库中的317例小脑症状、帕金森症、舞蹈症等不自主运动病例以及58例健康受试者进行了TBP基因CAG重复次数的调查。正常受试者中CAG重复次数为29-42。另一方面，在一组患有遗传性神经系统疾病的患者中，在来自 7 个家族的 11 个人中发现了具有 43-55 个重复的等位基因。等位基因具有43个或以上重复的患者临床表现相对一致，发病年龄（平均发病年龄31.8岁）与CAG重复次数呈较强负相关，神经系统症状包括痴呆、小脑症状、观察锥体外系症状（帕金森病、肌张力障碍、肌腱反射亢进）。当我们检查家族成员的TATA结合蛋白基因中的CAG/CAA多态性时，我们发现受影响的个体总是具有病理等位基因，杂合子，而正常个体具有正常等位基因，纯合子或杂合子。该疾病以常染色体显性遗传方式遗传。尸检大脑的免疫组织化学检查显示核聚集物呈 1C2 抗体和抗泛素抗体阳性。基于上述结果，我们认为我们发现的7个科构成一个单一的疾病单位，属于多聚谷氨酰胺疾病的范畴。