進行性腎障害の治療のためのTGF-β1標的新規遺伝子制御薬、PIポリアミドの創薬

PI聚酰胺的药物发现，一种靶向TGF-β1的新型基因调节药物，用于治疗进行性肾损伤

• 批准号: 08J06618
• 负责人: 松田 裕之
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J06618/
• 关键词: HCaRG; 尿細管上皮細胞; 急性腎不全; re-differentiation; 腎細胞癌; 細胞増殖; ERBB受容体; PI3K/Akt signal pathway; PIポリアミド; 腎硬化症; TGF-β1; 遺伝子治療薬; differentiation; 細胞周期

Hypertension-related, calcium-regulated gene (HCaRG)の腎臓での役割について検討するため、ヒトHCaRGを腎臓に過剰発現させた遺伝子改変マウスを作成し、腎動脈虚血再還流マウスの急性腎不全モデルを用いて実験を行った。HCaRGは急性尿細管障害後の生存率を約2倍改善した。また、腎機能低下も有意に抑制していた。尿細管上皮細胞の増殖を調べたところ、HCaRGは間質の繊維芽細胞には影響を与えず、尿細管上皮細胞の増殖のみを抑制していた。尿細管上皮の表現系を調べたところ、遺伝子改変マウスでは、明らかに成熟型の尿細管上皮細胞が多いことが分かった。HCaRGは腎障害後の治癒過程において、p53と独立した経路のp21の発現を介して、尿細管上皮細胞の細胞周期をコントロールし、脱分化した尿細管上皮細胞を、成熟型細胞に誘導することにより、急性腎不全後の生存率を改善したものと推測された。また、HCaRGを過剰発現させたマウス腎細胞癌細胞をマウスの皮下に移植したところ、HCaRGはコントロールに比べ、有意に腫瘍増殖、腫瘍血管新生を抑制した。腫瘍増殖抑制メカニズムを明らかにするため、PI3K/Akt/mTORとMAPK signal pathwayの発現について検討したところ、Akt, ERK1/2のリン酸化が抑制され、さらに下流のmTOR, HIF-1αの発現が抑制されていた。更に、これらの経路の上流に位置するERBB受容体はさまざまな腫瘍において過剰発現が報告されているが、培養細胞、皮下移植腎細胞癌の両方において、HCaRGはEGFRとHER3の発現をmRNAレベルで著しく抑制し、さらにHER2のリン酸化が抑制されていることが分かった。以上より、HCaRGはERBB受容体の過剰発現を伴う癌の抑制に働く可能性が示唆された。

为了研究高血压相关钙调节基因（HCaRG）在肾脏中的作用，我们创建了在肾脏中过表达人HCaRG的转基因小鼠，并开发了肾动脉缺血再灌注小鼠的急性肾衰竭模型实验。是使用进行的HCaRG使急性肾小管损伤后的存活率提高约2倍。它还显着抑制肾功能下降。在检查肾小管上皮细胞增殖时，HCaRG对间质成纤维细胞没有影响，仅抑制肾小管上皮细胞的增殖。当我们研究肾小管上皮的表型时，我们发现转基因小鼠显然具有更成熟的肾小管上皮细胞。在肾损伤后的愈合过程中，HCaRG控制肾小管上皮细胞的细胞周期，并通过p21的表达诱导去分化的肾小管上皮细胞成熟细胞，这是独立于p53的途径，推测这提高了存活率。急性肾功能衰竭后的发生率。此外，当将过度表达 HCaRG 的小鼠肾细胞癌细胞皮下移植到小鼠体内时，与对照组相比，HCaRG 显着抑制肿瘤生长和肿瘤血管生成。为了阐明肿瘤生长抑制机制，我们研究了PI3K/Akt/mTOR和MAPK信号通路的表达，发现Akt和ERK1/2的磷酸化被抑制，下游mTOR和HIF-1α的表达被抑制。到过。此外，据报道，位于这些途径上游的 ERBB 受体在各种肿瘤中过度表达，但 HCaRG 在培养细胞和皮下移植肾细胞癌中均在 mRNA 水平抑制 EGFR 和 HER3 表达。压制。这些结果表明 HCaRG 可能会抑制与 ERBB 受体过度表达相关的癌症。

项目成果

A Novel Gene Silencer, Pyrrole-Imidazole Polyamide Targeting Human Lox-1 Gene Improves Endothelial Cell Function.

一种新型基因沉默剂，吡咯-咪唑聚酰胺靶向人类 Lox-1 基因，可改善内皮细胞功能。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Journal of Hypertension 27
• 作者: Kaku Goto;Koichi Watashi;Daisuke Inoue;Makoto Hijikata;Kunitada;Hiroyuki Matsuda;Min Chen;Takahiro Ueno
• 通讯作者: Takahiro Ueno

Development of a novel gene silencer PI polyamide targeting TGF-β1 for chronic renal diseases and restenosis of artery

开发针对 TGF-β1 的新型基因沉默剂 PI 聚酰胺，用于治疗慢性肾病和动脉再狭窄

• 发表时间: 2008
• 作者: Kaku Goto;Koichi Watashi;Daisuke Inoue;Makoto Hijikata;Kunitada;Hiroyuki Matsuda;Min Chen;Takahiro Ueno;Noboru Fukuda;En-Hui Yao;En-Hui Yao;松田裕之;松田裕之;松田裕之;松田裕之;松田裕之
• 通讯作者: 松田裕之

Pyrrole-Imidazole Polyamide Targeting TGF-b1 inhibits restenosis and preserves endothelialization in the injured artery

吡咯-咪唑聚酰胺靶向 TGF-b1 抑制再狭窄并保留受损动脉的内皮化

• 发表时间: 2009
• 期刊: Cardiovascular research 81
• 作者: Kaku Goto;Koichi Watashi;Daisuke Inoue;Makoto Hijikata;Kunitada;Hiroyuki Matsuda;Min Chen;Takahiro Ueno;Noboru Fukuda;En-Hui Yao
• 通讯作者: En-Hui Yao

Hypertension-related, calcium-regulated gene(HCaRG)inhibits interstitial cells proliferation following unilateral ureteral obstruction.

高血压相关钙调节基因（HCaRG）抑制单侧输尿管梗阻后的间质细胞增殖。

• 发表时间: 2009
• 作者: Kaku Goto;Koichi Watashi;Daisuke Inoue;Makoto Hijikata;Kunitada;Hiroyuki Matsuda;Min Chen;Takahiro Ueno;Noboru Fukuda;En-Hui Yao;En-Hui Yao;松田裕之;松田裕之;松田裕之
• 通讯作者: 松田裕之

Role of Hypertension-related, calcium-regulated gene (HCaRG) in obstructive renal injury

高血压相关钙调节基因（HCaRG）在梗阻性肾损伤中的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: Kaku Goto;Koichi Watashi;Daisuke Inoue;Makoto Hijikata;Kunitada;Hiroyuki Matsuda;Min Chen;Takahiro Ueno;Noboru Fukuda;En-Hui Yao;En-Hui Yao;松田裕之;松田裕之;松田裕之;松田裕之
• 通讯作者: 松田裕之