マラリア原虫の増殖機構をターゲットとする新規マラリア治療薬の開発研究

针对疟原虫增殖机制的疟疾治疗新药研发

基本信息

批准号：
11147213
负责人：
藤井信孝
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)マラリア原虫、Plasmodium falciparum、の赤血球ステージの栄養に必須のヘモグロビン消化酵素PlasmepsinIIを標的とする抗マラリア剤に焦点を当てて,独自に開発した"aza-Payne転位反応"を応用した基質遷移状態模倣型酵素阻害剤合成研究を行った。(2)マラリア流行地域において数回の妊娠により獲得される保護抗体が世界の異なる各地域から分離される原虫のCSA結合能を阻害することに着目して、Plasmodium falciparum感染赤血球上に発現されている膜タンパク中のCSA-結合ドメインを同定することを目的として研究を行った。固相ペプチド合成法を応用してbiotin標識したChondroitinsulfateA及びCを合成し、これをプローブとしてCSA-結合性感染赤血球中(PRBC)に発現されているvar-geneをクローニンゲした。その結果、得られたvar-geneは8個の受容体様モチーフを有することを明らかにした。また、*受容体様モチーフをCHO-細胞表面に発現させることによりCSAとの結合能を評価し、biotin標識CSAを用いることにより2個のDuffy-結合様ドメイン(DBL-3及びDBL-7)がCSAと結合することを明確にした。このうちDBL-7はbiotin標識chondroitin sulfatc C(CSC)とも非特異的結合したが、DBL-3はCSCとは結合せず、DBL-3がCSAとの特異的な結合に関与していることが明らかとなった。すなわち、DBL-3ドメインのみがP.f.感染赤血球と同様な結合特異性を示すことを明らかにした。今回同定した、DBL-3ドメインは妊婦やその胎児を守るための保護免疫を誘起するワクチン候補として有用であると判断する。

(1) 使用独特开发的“aza-Payne重排反应”进行底物转换，重点关注针对血红蛋白消化酶Plasmepsin II的抗疟药物，该酶对于疟原虫恶性疟原虫红细胞阶段的营养至关重要我们开展了模拟状态酶抑制剂的合成研究。（2）针对疟疾流行地区通过多次妊娠获得的保护性抗体抑制世界不同地区分离的寄生虫的CSA结合能力的事实，我们开发了一种开发在感染恶性疟原虫的红细胞上表达的抗体的方法本研究的目的是鉴定膜蛋白中的 CSA 结合结构域。通过固相肽合成合成了生物素标记的硫酸软骨素 A 和 C，并使用它们作为探针，我们克隆了在感染的红细胞 (PRBC) 中表达的 CSA 结合 var 基因。结果表明，所获得的var基因具有八个受体样基序。此外，我们通过在 CHO 细胞表面表达*受体样基序来评估与 CSA 的结合能力，并通过使用生物素标记的 CSA，我们检测到两个 Duffy 结合样结构域（DBL-3 和 DBL-7））澄清它与CSA合并。其中，DBL-7也与生物素标记的硫酸软骨素C(CSC)非特异性结合，但DBL-3不与CSC结合，表明DBL-3参与与CSA的特异性结合。即，可知仅DBL-3结构域显示出与P.f.感染的红细胞类似的结合特异性。我们的结论是，这次鉴定的 DBL-3 结构域可作为候选疫苗，诱导保护性免疫，从而保护孕妇及其胎儿。