Fasリガンドの炎症誘導作用の分子機構の解析

Fas配体炎症诱导作用的分子机制分析

基本信息

批准号：
11140224
负责人：
須田貴司
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は昨年度の公募研究でFasリガンド導入したがん細胞を同系マウスの腹腔に移植すると、著名な好中球の浸潤を誘導すること、Fasリガンドは炎症細胞(主に好中球)にアポトーシス誘導すると同時に、IL-1βの活性化と放出を引き起こし、in vivoではこのIL-1βが炎症を増強しているらしいことを示した。さらに、Fasリガンド刺激により不活性化型のIL-1βが活性型に転換される際に、よく知られるIL-1β converting enzym (ICE)は必要でないことが示された。そこで本研究では、まず、FasリガンドによりIL-1βが活性化される際に働く蛋白分解酵素を同定するため、種々の阻害剤を用いてその特性を検討した。その結果、FasリガンドによるIL-1βの活性化にはカスペース以外にキモトリプシン様のセリンプロテアーゼが関与していると考えられ、異なるグループに属する蛋白分解酵素のカスケード反応の結果、IL-1βの転換が起こることが示唆された。一方、Fasリガンドには膜型と、それがメタロプロテアーゼによって分解されて生じる可溶型が存在するが、Fasリガンドの延症誘導活性、腫瘍拒絶促進活性にはどちらの型のFasリガンドが働いているかを検討した。その結果、これらの活性には主に膜型が働いていることが明らかになった。in vitroの実験から示唆されているような可溶型Fasリガンドの好中球に対する直接的な走化因子活性は、in vivoでは検出されなかった。

在我们去年的公开研究中，我们发现，当转染Fas配体的癌细胞被移植到同基因小鼠的腹膜腔中时，它们诱导了显着的中性粒细胞浸润，并且Fas配体诱导了炎症细胞（主要是中性粒细胞）的凋亡。随后，他们触发了 IL-1β 的激活和释放，并表明在体内，这种 IL-1β 似乎会增强炎症。此外，研究表明，当失活的 IL-1β 在 Fas 配体刺激下转化为活性形式时，不需要众所周知的 IL-1β 转化酶 (ICE)。因此，在本研究中，我们首先研究了各种抑制剂的特性，以确定当 IL-1β 被 Fas 配体激活时起作用的蛋白酶。结果认为，Fas配体对IL-1β的活化除了半胱天冬酶之外还涉及胰凝乳蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，并且作为属于不同组的蛋白酶的级联反应的结果，发生IL-1β的转化。建议出现这种情况。另一方面，Fas配体有两种类型：膜型和被金属蛋白酶降解时产生的可溶型。我考虑是否存在。结果表明，这些活性主要是由膜类型引起的。正如体外实验所表明的，可溶性 Fas 配体对中性粒细胞的直接趋化活性在体内并未检测到。