成人T細胞白血病に対する遺伝子工学を用いた治療の開発

利用基因工程开发成人 T 细胞白血病治疗方法

• 批准号: 10153255
• 负责人: 松岡 雅雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153255/
• 关键词: 成人T細胞白血病; HTLV-1; アポトーシス; Fas抗原; Fasリガンド; メチル化

腫瘍性血液疾患の中でも最も予後不良である成人T細胞白血病(ATL)の新しい治療法の開発につながる研究を目指している。ATL細胞は活性化Tリンパ球の性質を有しておりFas-FasL系の活性化によってアポトーシスを効率よく誘導できることよりFas-FasL系のシグナルを介した治療法の開発を行う。1) ATL細胞はTPA,ConA刺激によってもFasLの発現誘導が認められずFasL遺伝子の発現抑制が起こっていると考えられる。我々はFasL遺伝子にメチル化が起こっていることをMethylation-speciflc PCRで証明した。また脱メチル化を起こす5-aza-2'-deoxycytidine(5-Aza-CdR)で処理するとFasLの発現誘導が認められ、この発現はTPAなとの刺激で相加的に増強された。2) 5-ka-CdRによりFasL遺伝子を発現させたATL細胞株ではアポトーシスが誘導されることをAnnexinVを使った解析で明らかにした。また、このアポトーシスはFas-Fc chimeraによって抑制されることよりFas-FasL系のシグナルが、このアポトーシスに関与していることが示された。3) ATL細胞においてはFasL遺伝子のメチル化に加えてp16遺伝子のメチル化も高率に(89%)存在しており脱メチル化を起こす5-Aza-CdRがp16遺伝子の再発現と増殖抑制を起こすことを明らかにした。

我们的目标是开展研究，开发成人 T 细胞白血病 (ATL) 的新疗法，这种疾病在肿瘤血液疾病中预后最差。由于ATL细胞具有活化T淋巴细胞的特性，可以通过激活Fas-FasL系统有效诱导细胞凋亡，因此我们将开发由Fas-FasL系统信号介导的治疗方法。 1)即使通过TPA和ConA刺激，ATL细胞中FasL表达也没有被诱导，表明FasL基因表达被抑制。我们通过甲基化特异性 PCR 证明了 FasL 基因中发生了甲基化。此外，用引起去甲基化的5-aza-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）处理诱导FasL表达，并且该表达通过TPA刺激而进一步增强。 2)使用AnnexinV分析表明，在由5-ka-CdR表达FasL基因的ATL细胞系中诱导细胞凋亡。此外，这种细胞凋亡被Fas-Fc嵌合体抑制，表明Fas-FasL系统信号参与了这种细胞凋亡。 3）在ATL细胞中，除了FasL基因甲基化之外，p16基因甲基化也以很高的比例存在（89%），并且导致去甲基化的5-Aza-CdR抑制p16基因的再表达和增殖。会导致