食道癌腫瘍微小環境に関連する２つの新規候補ペプチド断片による転移・予後解析

使用与食管癌肿瘤微环境相关的两种新型候选肽片段进行转移和预后分析

• 批准号: 24791436
• 负责人: 佐々木 健
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791436/
• 关键词: 癌; 外科

本研究は食道癌患者の血清中に出現する腫瘍微小環境関連候補分子として我々が新規に同定したα１-アンチトリプシン(A1AT)断片とトランスサイレチン(TTR)断片を高速プロテオーム解析法で同定・定量することで病態を把握し、リンパ行性転移の成立に関する分子生物学的特性の研究と関連させ、リンパ行性転移のメカニズム、リンパ節微小転移の臨床的意義、癌の悪性度、腫瘍微小環境などを解明し、これらの基礎研究の結果を臨床に還元することを目的とする。食道癌患者と健常者を対象に血清中A1ATペプチド断片を定量し、臨床病理学的因子との関連を検討した結果、食道癌患者の38.5%で血清中A1ATペプチド断片陽性であった。また、リンパ節転移陽性症例での陽性率は80%であり、血清A1ATペプチド断片陽性はリンパ節転移陽性のマーカーとなりうる可能性が示唆された。今後、予後解析を行う。食道癌原発巣におけるケモカイン・ケモカインレセプター（CXCL12、CXCR4）、脈管新生因子と脈管新生の程度を免疫染色（VEGF、CD105、D2-40）と微小脈管密度を用いて評価した結果、CXCL12、CXCR4の発現と脈管新生の程度との関連が示唆された。今後は手術で得られたリンパ節材料においても原発巣と同様の検討を行う。また、通常行われるH.E.染色に加え、サイトケラチンによる免疫組織学的方法とCEA-mRNAをprimerとしたRT-PCRにより、リンパ節微小転移を同定・検出し、臨床的意義を明らかにする。さらに、A1ATとTTRのペプチド断片がプロテアーゼの作用により親蛋白から切断されたものなのか、あるいは、腫瘍組織でのde novo産生によるものなのかを細胞株・動物実験により明らかにする。

本研究采用高速蛋白质组分析方法来鉴定和定量α1-抗胰蛋白酶（A1AT）和运甲状腺素蛋白（TTR）片段，我们新鉴定出它们是食管癌患者血清中出现的肿瘤微环境相关候选分子。疾病状态由结合淋巴转移建立相关的分子生物学特性研究，阐明淋巴转移的机制、淋巴结微转移的临床意义、癌症的恶性程度、肿瘤微环境等。将基础研究成果转化为临床实践。对食管癌患者和健康受试者血清A1AT肽片段进行定量并检查其与临床病理因素的关系，结果显示，38.5%的食管癌患者血清A1AT肽片段呈阳性。此外，淋巴结转移阳性病例的阳性率为80%，提示血清A1AT肽片段阳性可作为淋巴结转移阳性的标志物。我们将在未来进行预测分析。使用免疫染色（VEGF、CD105、D2-40）和微血管密度评估食管癌原发肿瘤的趋化因子/趋化因子受体（CXCL12、CXCR4）、血管生成因子和血管生成程度，结果发现CXCL12、 CXCR4 表达与血管生成程度之间存在关系。将来，手术中获得的淋巴结材料将以与原发肿瘤相同的方式进行检查。除了通常的H.E.染色外，我们还将使用使用细胞角蛋白的免疫组织学方法和使用CEA-mRNA作为引物的RT-PCR来识别和检测淋巴结微转移并阐明其临床意义。此外，我们将利用细胞系和动物实验来确定A1AT和TTR的肽片段是否是通过蛋白酶的作用从母体蛋白上裂解下来的，或者它们是否是在肿瘤组织中从头产生的。

项目成果

食道扁平上皮癌患者における血清α１-アンチトリプシンペプチド断片の測定意義

食管鳞癌患者血清α1-抗胰蛋白酶肽片段测定的意义

• 发表时间: 2012
• 作者: 佐々木健;奥村浩;内門泰斗;喜多芳昭;松本正隆;大脇哲洋;石神純也;上野真一;夏越祥次;清水利昭;竹之内和則;橋口照人
• 通讯作者: 橋口照人