Physiological and pharmacological analyses of the mammalian Peripheral vestibular system including Sensory organs and vestibular ganglia

哺乳动物外周前庭系统（包括感觉器官和前庭神经节）的生理学和药理学分析

基本信息

批准号：
19591958
负责人：
ITO Ken
金额：
$ 3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591958/
关键词：
細胞・組織シグナル伝達神経科学生理学脳・神経

项目摘要

ラット前庭神経節細胞の細胞体にその末梢受容器(耳石器・半規管膨大部)を付着した標本を作成し、細胞生理学的実験を行う手法を確立した。培養方法としては、Leibovitz's L-15を使用した短時間(< 5hr)培養が最適であることが分かった。生理学的実験 : 末梢前庭器-前庭神経細胞体を一体とする標本において、神経のパッチクランプ記録を行うことが可能となった。脱分極刺激(電流注入)による神経発火パターンを記録したところ、主にphasic typeの発火であり、今のところ単離・培養したものと大きな違いが無い結果となっている。同様の標本において前庭神経節細胞をパッチクランプして性質を調べた上でピペット内に予め入れておいたビオチンにより逆向性染色を行う実験は、パッチクランプの成功率が不十分で、また実験中に細胞が死んだりパッチが外れてしまうトラブルが多いことから未だ信頼に足る結果が得られていない。免疫組織学的・分子生物学的実験 : 末梢前庭器-前庭神経細胞体を一体とする標本において、神経細胞の性質等を検索した後に細胞質を電極内に吸引し、Single Cell RT-PCRを行う実験は成功率が低く、その原因は単離細胞と異なり内容の吸引が難しいことであると分かった。未だ信頼性の高いデータとはなっていない。前庭神経節の興奮性の調節に関与すると分かったイオンチャネルやリガンド受容体の免疫染色については、試薬を購入して実験を開始したばかりの段階である。本研究のここまでの成果を踏まえて、今後も研究を継続する予定である。

在大鼠伴随海军细胞细胞的细胞中建立了粘附于外周受体（Oloolate，半调节的管膨胀）的标本，并建立了一种进行细胞生理实验的方法。至于培养方法，发现使用Leibovitz的L-15进行短（<5hr）培养是最佳的。生理实验：在整合前庭神经细胞的标本中，可能会在神经贴片夹的神经贴片夹记录神经贴片夹。当由于记录了去除刺激（电流注射）引起的神经感染的模式时，它主要是阶段类型的火，并且到目前为止，孤立和培养的情况没有显着差异。在同一标本中，通过斑块夹夹夹板染色的实验，前庭神经细胞染色，检查特性，然后提前放入移液管的斑块夹夹的成功率不足。细胞死亡，斑块脱落，因此仍然没有可靠的结果。免疫原理和分子生物学实验：整合前庭神经细胞的外围前码，在搜索神经细胞的性质后将细胞吸入电极，并进行了单细胞RT-PCR。与隔离细胞不同，成功率低，很难吸取含量。它仍然不是可靠的数据。关于离子通道和配体受体免疫染色，发现与前庭节点的娱乐有关，这只是购买试剂并开始实验的阶段。根据这项研究的结果，我们计划继续研究。