DNA修復におけるRad51とp53遺伝子の役割

Rad51 和 p53 基因在 DNA 修复中的作用

• 批准号: 10151228
• 负责人: 森田 隆
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10151228/
• 关键词: 相同組換え; p53; Rad51; Dmcl; 細胞周期チェックポイント; アポトーシス; 減数分裂

本研究の目的は、放射線や化学物質によるDNA損傷がもたらす発がん過程において、p53タンパクとDNA二重鎖切断の修復をおこなうRAD51タンパクや減数分裂特異的組換えタンパクDMClタンパクがどのように細胞周期を停止させDNAを修復するか、あるいはアポトーシスを導き、がんの発生を抑制しているかを明らかにすることである。我々は、Dmcl遺伝子のノックアウトマウスは相同染色体の対合不全のため、減数分裂が停止し、ザイゴテン期の細胞が3-5層に精細管のなかで重層し、それらがアポトーシスを起こすことを明らかにした。精巣のタンパク抽出液をもちいて免疫沈降したところp53タンパクがDMC1タンパクが共沈することが明らかとなった。RAD51タンパクは、精巣では発現しているにもかかわらず共沈しなかった。これらのことから、減数分裂期にp53タンパクはDMClタンパクと結合し通常不活性な状態にあるが、Dmc1遺伝子欠損などのような減数分裂期の染色体の異常が見つかれば、p53が活性化され、速やかにアポトーシスを促進させると考えられる。

本研究的目的是探讨p53蛋白、修复DNA双链断裂的RAD51蛋白以及减数分裂特异性重组蛋白DMCl在辐射或化学物质引起的DNA损伤引起的致癌过程中如何控制细胞周期。目的是查明它是否能阻止癌症并修复 DNA，或诱导细胞凋亡并抑制癌症发展。我们发现，在Dmcl基因敲除小鼠中，由于同源染色体缺乏配对，减数分裂停滞，处于合子期的细胞在生精小管中堆积成3-5层，导致细胞凋亡。使用睾丸蛋白提取物进行免疫沉淀显示 p53 蛋白与 DMC1 蛋白共沉淀。尽管 RAD51 蛋白在睾丸中表达，但并未共沉淀。根据这些事实，p53蛋白在减数分裂期间与DMC1蛋白结合并且通常不活跃，但是如果发现减数分裂染色体异常例如Dmc1基因缺失，则认为p53快速促进细胞凋亡。