脂質を標的にした新しい免疫システムの解明～皮膚免疫をモデルとして～

阐明针对脂质的新免疫系统〜以皮肤免疫为模型〜

基本信息

批准号：
07J02308
负责人：
大塚篤司
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

近年、Th2免疫応答を誘導する上で重要な免疫担当細胞として好塩基球が注目されている。そこで我々は脂質抗原により誘導されるTh2タイプの皮膚遅延型反応と好塩基球、もしくはアレルギー反応のエフェクター細胞である肥満細胞、それぞれとの関係を検討することとした。IL-4遺伝子のイントロン2に存在するイントロニックエンハンサー(I.E.)は肥満細胞特異的に、また、エクソン4下流の4Kbのわたる領域(p3')は好塩基球特異的にそれぞれIL-4遺伝子発現を制御する領域であることが報告されている。上記の細胞特異的遺伝子発現システムを用いて、ジフテリアトキシン受容体(DT-R)を挿入した肥満細胞特異的DT-R Tgマウス(MaS TRECK)および好塩基球特異的DT-R Tgマウス(BaS TRECK)を作成した。そこで我々はまず、このマウスを用いて一般的な接触皮膚炎における肥満細胞および好塩基球の役割について検討した。BaS TRECKトランスジェニックマウスにおける接触皮膚炎反応の程度は野生型B6マウスと変わらないのに対し、MaS TRECKトランスジェニックマウスはDNFBおよびOxazoloneによって誘導される接触皮膚炎が低下していることが明らかとなった。特に接触皮膚炎の感作相において肥満細胞が重要であることをadoptive transferの系を用いて明らかとした。肥満細胞が欠損した状態では皮膚由来の樹状細胞はリンパ節への遊走能およびmaturationの低下が見られた。骨髄由来樹状細胞(BMDC)および骨髄由来肥満細胞(BMMC)を作成し、in vitroでの検討を行った。BMMC存在下でBMDCを共培養するとBMDCのmaturation、遊走能の亢進、さらには生存期間が延長することが明らかとなった。さらにこれら樹状細胞と肥満細胞の相互作用は細胞接着を介して起こっており、ICAM-1およびLFA-1刺激により肥満細胞がmembrane bound TNF αを発現することで樹状細胞を活性化することを明らかとした。

近年来，嗜碱性粒细胞作为诱导Th2免疫反应的重要免疫活性细胞而受到关注。因此，我们决定研究脂质抗原诱导的Th2型迟发性皮肤反应与过敏反应效应细胞嗜碱性粒细胞或肥大细胞之间的关系。 IL-4基因内含子2中存在的内含子增强子(I.E.)在肥大细胞中特异性表达IL-4基因，并且外显子4下游的4Kb区域(p3')在嗜碱性粒细胞中特异性表达IL-4基因。据报道，这是一个控制区域使用上述细胞特异性基因表达系统，创建了肥大细胞特异性DT-R Tg小鼠（MaS TRECK）和嗜碱性粒细胞特异性DT-R Tg小鼠（BaS TRECK）。因此，我们首先使用这些小鼠研究了肥大细胞和嗜碱性粒细胞在常见接触性皮炎中的作用。 BaS TRECK 转基因小鼠的接触性皮炎反应程度与野生型 B6 小鼠没有差异，而 MaS TRECK 转基因小鼠表现出 DNFB 和恶唑酮 Ta 诱导的接触性皮炎减轻。使用过继转移系统，我们证明肥大细胞在接触性皮炎的致敏阶段特别重要。在没有肥大细胞的情况下，皮肤来源的树突状细胞表现出向淋巴结的迁移能力和成熟度降低。在体外生成并研究了骨髓源性树突状细胞（BMDC）和骨髓源性肥大细胞（BMMC）。已经清楚的是，在 BMMC 存在的情况下共培养 BMDC 可增强 BMDC 的成熟、迁移能力并延长生存时间。此外，树突细胞和肥大细胞之间的这些相互作用通过细胞粘附发生，并且肥大细胞在 ICAM-1 和 LFA-1 刺激下通过表达膜结合的 TNF α 来激活树突细胞。