ビタミンD活性化酵素、1-水酸化酵素発現に対するレプチンの制御機構の解析

瘦素对维生素D激活酶1-羟化酶表达的调控机制分析

• 批准号: 18791374
• 负责人: 松沼 礼子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Ohu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791374/
• 关键词: レプチン; 1α-水酸化酵素; Ob-Rb; Ob-Ra; db; dbマウス; leptin; 24-水酸化酵素; 1,25(OH)_2D_3; ob; ob mice; db mice

レプチンが腎臓の近位尿細管に特異的に存在する1α-水酸化酵素の遺伝子発現を抑制する詳細なメカニズムの解明を試みた。活性型レプチン受容体(Ob-Rb)に異常があり主要なレプチンシグナルが欠損しているdb/dbマウスを用いた実験から、レプチンの1α-水酸化酵素現抑制作用はOb-Rbを介したものであることが見出された。レプチンの腎近位尿細管細胞への直接作用を確認するために、マウス腎臓から近位尿細管細胞の初代培養を行い実験に用いた。しかし、1α-水酸化酵素の遺伝子発現はレプチンにより抑制されなかった。1α-水酸化酵素遺伝子発現は、細胞内cAMPの上昇により誘導されることが知られている。そこで、cAMPの活性化剤であるforskolinを添加して1α-水酸化酵素の発現を亢進させた状態を作りだし、レプチンの作用を調べた。しかし、レプチンは1α-水酸化酵素遺伝子発現を抑制しなかった。細胞内のcAMP量は、レプチン処理を行っても変化しなかった。この細胞におけるカルシウム代謝関連遺伝子の発現を確認した。副甲状腺ホルモン受容体(PTHR)およびVDRの遺伝子発現が認められた。また、近位尿細管細胞に特異的に発現しているメガリンおよび1α-水酸化酵素の遺伝子発現が確認された。しかし、主に遠位尿細管細胞で発現しているカルシトニン受容体遺伝子の発現量は極めて低かった。このことから、この初代細胞株は腎近位尿細管細胞主体であると考えられた。この細胞でのレプチン受容体遺伝子の発現を確認したところ、細胞内ドメインの短いOb-Raの発現は見られたが、Ob-Rbの発現は全く認められなかった。以上のことより、レプチンの1α-水酸化酵素発現抑制は、腎近位尿細管細胞への直接作用によるものではなく、他器官、組織のOb-Rbを介した二次的な作用であることが見出された。

我们试图阐明瘦素抑制1α-羟化酶的基因表达的详细机制，该机制特异性地存在于肾脏的近端小管中。使用活性瘦素受体（OB-RB）和缺乏主要瘦素信号的DB/DB小鼠的实验表明，瘦素的1α-羟化酶抑制作用是由OB-RB介导的。为了确认瘦素对近端肾小管细胞的直接作用，对小鼠肾脏的近端肾小管细胞的一级培养进行了，并在实验中使用。然而，瘦素不会抑制1α-羟化酶的基因表达。众所周知，1α-羟化酶基因表达是由细胞内cAMP升高诱导的。因此，添加了CAMP的激活剂Forskolin，以创建一个状态，其中1α-羟化酶的表达增加了，并检查了瘦素的作用。但是，瘦素没有抑制1α-羟化酶基因的表达。即使在瘦素治疗后，细胞中的cAMP数量也不会改变。证实了该细胞中钙代谢相关基因的表达。观察到甲状旁腺激素受体（PTHR）和VDR的基因表达。此外，确认了在近端管状细胞中特异性表达的梅加林和1α-羟化酶的基因表达。然而，主要在远端管状细胞中表达的降钙素受体基因的表达水平极低。这表明该主要细胞系主要是肾近端小管细胞。当在该细胞中证实瘦素受体基因的表达时，观察到了细胞内结构域短的OB-RA的表达，但未观察到OB-RB。从上面可以发现，瘦素表达1α-羟化酶的表达不是由于对近端肾小管细胞的直接作用，而是其他器官和组织中OBB的次要作用。

项目成果

Effect of leptin on regulation of renal 25-hydroxyvitamin D_3 metabolism and maintenance of calcium homeostasis.

瘦素对肾脏 25-羟基维生素 D_3 代谢调节和钙稳态维持的影响。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Oral Biosciences 49
• 作者: Takashi Ito;et. al.;客本斉子;Seiko Kyakumoto;Ayako Matsunuma;Ayako Matsunuma
• 通讯作者: Ayako Matsunuma

レプチンはOB-Rbを介して1α-水酸化酵素発現を抑制する

瘦素通过 OB-Rb 抑制 1α-羟化酶表达

• 发表时间: 2007
• 作者: Takashi Ito;et. al.;客本斉子;Seiko Kyakumoto;Ayako Matsunuma;Ayako Matsunuma;Ayako Matsunuma;松沼 礼子
• 通讯作者: 松沼 礼子