インターフェロンによる新たな肝癌細胞着床防止機構の解明

阐明干扰素预防肝癌细胞植入的新机制

基本信息

批准号：
18790962
负责人：
居村暁
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790962/
关键词：
肝細胞癌インターフェロン抗腫瘍効果転移・着床抑制

项目摘要

目的:IFN、5FU+CDDP全身化学療法の肝細胞癌着床防止における有用性およびその機序を明らかにすること方法:CH3マウス及び、マウスMH134肝癌細胞株(東北大学加齢研究所)、薬剤はPeg-IFN_2b、5-FUを使用した。肝転移モデルは経門脈的に腫瘍細胞を注入し作成した。転移モデルを用いて、Peg-IFN_2bの転移抑制効果について検討した。検討1. in vitro : Peg-IFNの細胞増殖抑制効果、アポトーシス効果を確認する。細胞増殖抑制効果;MTT assay, Caspase assay、血管新生: Real-time PCR (VEGF, bFGF, MMP2,7,9)検討2.皮下モデル:マウス皮下に1×10^6個の細胞を投与し皮下モデルを作成。腫瘍径を経時的に測定し抗腫瘍効果を検討した。検討3.脾注モデル:マウス脾臓にIX10^6個の細胞を投与し肝転移モデルを作成した。抗腫瘍効果;腫瘍コロニー個数、Caspase assay、血管新生; Mivrovessel densityの測定、Real-time PCR (VEGF, bFGF, MMP2/7/9)結果1.細胞レベルではPeg-IFNは細胞増殖抑制効果を示した(MTTassay、投与48時間後/投与前=73.8%)。また、Peg-IFN投与細胞ではVEGFmRNAの発現が有意に抑制された(Control:PegIFN(1×10^5U/ml) =0.86±0.21:0.71±0.30)。結果2.皮下モデルにおいてPeg-IFN投与群はControlと比べ有意な腫瘍増殖抑制効果を示した(腫瘍径(cm) ;Control:Peg-IFN2100U/ml:PegIFN21000U/ml=5.6±0.4:2.7±0.9:0.5±0.4)。(1μg=0.07MIU=70000IU)結果3.脾注モデルにおいてPeg-IFN投与群はControlと比べ有意に肝転移を抑制した(コロニー数; Control:Peg-IFN2100U/ml:PegIFN21000U/ml=19.3±1.2:9.5±3.0:6.0±3.0)。CD34免疫染色では、Peg-IFN群でControlと比べ有意にvascular progenitor cell が減少していた(Control:PegIFN21000U/ml=51±12:32±10)。考察ならびに結論:本研究結果から、皮下、脾注モデルにおいてPeg-IFNがVEGF発現、血管新生を抑制することにより腫瘍の転移・増殖を抑制したことが明らかとなった。今後、Peg-IFNの細胞接着抑制効果の研究を進めていく予定である。

目的：阐明IFN、5FU+CDDP全身化疗在预防肝细胞癌种植中的作用和机制。方法：CH3小鼠和小鼠MH134肝癌细胞系（东北大学衰老研究所），药物使用Peg-IFN_2b和5-。福。通过门静脉注射肿瘤细胞建立肝转移模型。使用转移模型，我们研究了 Peg-IFN_2b 的转移抑制作用。研究1.体外：证实Peg-IFN的细胞增殖抑制作用和凋亡作用。细胞增殖抑制作用；MTT测定、Caspase测定、血管生成：实时PCR（VEGF、bFGF、MMP2,7,9）研究2.皮下模型：给小鼠皮下注射1×10^6细胞建立模型。随着时间的推移测量肿瘤直径以检查抗肿瘤效果。研究3.脾脏注射模型：将10^6个IX细胞注射到小鼠脾脏中建立肝转移模型。抗肿瘤作用；肿瘤集落数、caspase测定、血管生成；微血管密度测量、实时PCR（VEGF、bFGF、MMP2/7/9）结果1.在细胞水平上，Peg-IFN表现出细胞增殖抑制作用。 MTT 测定，给药后 48 小时/给药前 = 73.8%）。此外，Peg-IFN处理的细胞中VEGF mRNA表达显着受到抑制（对照：PegIFN（1×10^5U/ml）=0.86±0.21：0.71±0.30）。结果2.在皮下模型中，Peg-IFN给药组与对照（肿瘤直径（cm）相比）显示出显着的肿瘤生长抑制作用；对照：Peg-IFN2100U/ml：PegIFN21000U/ml=5.6±0.4：2.7± 0.9:0.5±0.4)。 (1μg=0.07MIU=70000IU)结果3.在脾注射模型中，与对照相比，Peg-IFN给药组的肝转移被显着抑制（集落数；对照：Peg-IFN2100U/ml：PegIFN21000U/ml=19.3） ±1.2:9.5±3.0:6.0±3.0)。 CD34免疫染色显示，与对照相比，Peg-IFN组的血管祖细胞显着减少（对照：PegIFN21000U/ml=51±12:32±10）。讨论和结论：本研究结果表明，在皮下和脾注射模型中，Peg-IFN 通过抑制 VEGF 表达和血管生成来抑制肿瘤转移和生长。未来，我们计划继续研究Peg-IFN抑制细胞粘附的作用。