組織片受容体結合実験法を用いた脳内ムスカリン受容体の解析

使用组织片段受体结合实验分析大脑中的毒蕈碱受体

• 批准号: 18790364
• 负责人: ANISUZZAMAN A・S
• 金额: $ 2.31万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790364/
• 关键词: 組織片結合実験法; ムスカリン受容体; 細胞内M1サブタイプ; 大脳皮質・海馬; サブタイプ; ラット; チミジン取り込み

私たちは、細胞を破壊せず組織片をそのまま用いる組織片結合実験法(tissue segment bindingmethod)を開発しました。この方法では組織片をそのまま用いるため、受容体環境を変化させることなく、組織に存在する受容体を直接同定できます。昨年度は、この方法を用いてラットやヒトの脳および末梢組織のムスカリン受容体が同定できることを証明しました。今年度はさらにこの実験を発展させ、以下の点を明らかにしました。1. ラットの大脳皮質と海馬は、脳の他の部位および末梢組織とは異なり、ムスカリン受容体のM1サブタイプを細胞内小胞体にも存在する。2. 拘束ストレスを負荷すると、この細胞内M1サブタイプは特異的に消失する。3. 細胞内M1サブタイプは老化とともに減少し、生後20ヶ月のラットでは存在しない。4. 細胞内M1サブタイプの脳内での分布から記憶と学習との関係が示唆されたので、水迷路試験を行い、上記細胞内M1サブタイプが消失した状態では、学習能力が著しく抑制されることを明らかにした。以上の結果などより、大脳皮質・海馬に特異的に存在する細胞内M1サブタイプは、脳高次機能と密接に関係することを明らかにした。

我们开发了一种组织片段结合方法，该方法使用组织片段而不破坏细胞。由于该方法直接使用组织碎片，因此可以在不改变受体环境的情况下直接识别组织中存在的受体。去年，我们证明这种方法可用于识别大鼠和人类大脑和外周组织中的毒蕈碱受体。今年，我们进一步开展了这个实验，明确了以下几点。 1、与大脑其他部位和周围组织不同，大鼠大脑皮层和海马细胞内内质网中也存在M1亚型毒蕈碱受体。 2.当施加约束应力时，这种细胞内M1亚型被特异性废除。 3.细胞内M1亚型随年龄增长而减少，20月龄大鼠中不存在。 4.由于细胞内M1亚型在大脑中的分布提示了记忆与学习之间的关系，我们进行了水迷宫测试，发现当上述细胞内M1亚型消失时，学习能力被显着抑制。上述结果表明，细胞内M1亚型特异存在于大脑皮层和海马区，与大脑高级功能密切相关。

项目成果

組織片結合実験法によるラット胃におけるムスカリン受容体サブタイプの同定とストレスの影響

使用组织碎片结合实验和应激的影响鉴定大鼠胃中的毒蕈碱受体亚型

• 发表时间: 2008
• 作者: Ahmed M.;Muramatsu I.;et al.;村松 郁延
• 通讯作者: 村松 郁延

Identification of alpha-1L adrenoceptor in rat cerebral cortex and possible relationship between alpha-1L and alpha-1A adrenoceptors.

大鼠大脑皮层α-1L肾上腺素受体的鉴定以及α-1L和α-1A肾上腺素受体之间可能的关系。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Br. J. Pharmacol. 153
• 作者: Niwa M;Hara A;Taguchi A;Aoki H;Kozawa O;Mori H.;Morishima S.
• 通讯作者: Morishima S.

組織片結合実験法によるムスカリン受容体の同定

使用组织片段结合实验鉴定毒蕈碱受体

• 发表时间: 2007
• 作者: Muramatsu;I;Ikunobu Muramatsu;Muramatsu;村松 郁延;Muramatsu;村松 郁延
• 通讯作者: 村松 郁延