1,25(OH)_2D_3受容体による軟骨細胞の分化制御機構の解明

阐明1,25(OH)_2D_3受体控制软骨细胞分化的机制

基本信息

批准号：
06771626
负责人：
中島和久
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771626/
关键词：
軟骨細胞細胞分化無血清培養甲状腺ホルモン

项目摘要

1,25(OH)_2VD_3(VD)が欠乏すると成長板では肥大化層の拡大と石灰化不全が起こる。そこで本研究は、VDによる軟骨細胞の分化制御機構の解明を目的として以下の実験を行った。1)従来の軟骨細胞培養系では、成長板軟骨細胞は血清の刺激によって増殖して肥大化する。軟骨細胞の肥大化の制御機構をより詳細に追求するために、軟骨細胞の無血清培養系を開発した。培養液にbasic FGF,transferrin,hydrocortisoneおよびlipoprotein fractionの4種類の因子を添加すると、軟骨細胞は分化形質を失わずに増殖した。2)培養液に4種類の因子を添加して培養しても軟骨細胞は肥大化しなかった。この培養系から全ての因子を除いて甲状腺ホルモンを添加すると。軟骨細胞は速やかに肥大化した。3)肥大軟骨細胞のマーカーであるアルカリフォスファターゼの発現を検討した。甲状腺ホルモンはアルカリフォスファターゼ遺伝子の発現を促進した。4)軟骨細胞の機能を調節することが知られている副甲状腺ホルモンやbFGFは甲状腺ホルモンの肥大化促進作用を抑制した。5)この培養系から全ての因子を除いて1,25(OH)_2VD_3を添加しても軟骨細胞は肥大化しなかった。甲状腺ホルモンと共に添加すると1,25(OH)_2VD_3は甲状腺ホルモンの肥大化促進作用を抑制した。一方、24,25(OH)_2VD_3は肥大化を抑制しなかった。上記の結果は軟骨細胞の肥大化は甲状腺ホルモンによって制御されていること、および、1,25(OH)_2VD_3は甲状腺ホルモンの働きを抑制することによって作用することを示唆している。今後、甲状腺ホルモンの肥大化促進作用の分子機構を解明すると同時に、1,25(OH)_2VD_3の作用発現機構を追求する。

1,25(OH)_2VD_3(VD) 缺乏会导致肥厚层扩张和生长板矿化失败。因此，在本研究中，我们进行了以下实验，旨在阐明VD控制软骨细胞分化的机制。 1) 在传统的软骨细胞培养系统中，生长板软骨细胞由于血清刺激而增殖和增大。为了更详细地研究软骨细胞肥大的控制机制，我们开发了软骨细胞无血清培养系统。当将碱性 FGF、转铁蛋白、氢化可的松和脂蛋白组分四种类型的因子添加到培养基中时，软骨细胞在不失去其分化特征的情况下增殖。 2)即使在培养基中添加4种因子来培养软骨细胞，软骨细胞也不会增殖。当从该培养系统中除去所有因素并添加甲状腺激素时。软骨细胞迅速增大。 3)研究了肥大软骨细胞标志物碱性磷酸酶的表达。甲状腺激素促进碱性磷酸酶基因表达。 4)已知调节软骨细胞功能的甲状旁腺激素和bFGF抑制了甲状腺激素的肥大促进作用。 5) 即使从该培养系统中除去所有因子并添加1,25(OH)_2VD_3，软骨细胞也不会增大。当与甲状腺激素一起添加时，1,25(OH)_2VD_3抑制了甲状腺激素的促肥大作用。另一方面，24,25(OH)_2VD_3 没有抑制肥大。上述结果表明软骨细胞肥大受甲状腺激素控制，1,25(OH)_2VD_3通过抑制甲状腺激素的作用而发挥作用。今后我们将阐明甲状腺激素促肥大作用的分子机制，同时追寻1,25(OH)_2VD_3的作用表达机制。