細胞シートと組織還流培養装置を用いた血管付き心筋組織の再生

使用细胞片和组织灌注培养装置再生血管化心肌组织

基本信息

批准号：
17700404
负责人：
清水達也
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17700404/
关键词：
再生医学組織・細胞生体材料細胞・組織

项目摘要

In vitroで毛細血管網を伴った厚い機能的な心筋組織を再生させることを目的にin vivoから吻合可能な動静脈とその血流が支配する周囲の結合組織を採取し、その動静脈を培養液で還流したうえでその組織上に心筋細胞シートの重層化を行うことを試みた。平成18年度は平成17年度に開発した組織培養装置(バイオリアクター)を用いて血管付き組織のさらなる長期培養を行うとともに、心筋細胞シートの重層化実験を行った。長期培養に関しては還流培地の組成や流量をかえることにより2日までの組織培養が可能となった。静脈外からの漏出も組織培養用のチャンバーに改良を加えることにより10〜20%に軽減でき、安定した還流量を確保することができた。動脈側と静脈側の酸素分圧、血糖、乳酸濃度を測定、比較したところ酸素分圧および血糖値は低下し乳酸値が上昇していた。これらの変化は心筋シートの重層化により増大した。このことは生体外で接着させた心筋シートが血管付き組織と結合し連続的な血管網が再生されたことを示唆した。実際組織切片を観察したところ心筋シートに管腔様構造を認め、さらに免疫染色によりこれらの管腔が血管内皮細胞で構築されていることが確認された。これらの結果は生体と同様に動脈から注入された培養液により重層化心筋細胞シートを含む組織に酸素と栄養が供給され、老廃物が静脈から排出されたことを意味し、重層化心筋シート内の血管網の再構築を裏付けるものであった。今後、重層化心筋シート内の血管網新生過程を解析するとともにさらなる長期培養にむけたバイオリアクターの開発ならびに培養条件の最適化を行う。

在体外，我们试图在体外用毛细血管网络再生厚的功能性心肌组织，可在其血流控制的动静脉和周围的结缔组织中再生，然后用培养基和分层的心肌细胞板将动静脉反流到组织中。 2006年，我们使用2005年开发的组织培养装置（生物反应器）对血管组织进行了进一步的长期培养，并进行了心肌细胞板的分层实验。对于长期培养，可以通过更改回流培养基的组成和流速来制定组织培养。通过增加组织培养室的改善，从静脉外部的泄漏也可以降低至10-20％，从而导致稳定的反流率。当测量氧气压，血糖和乳酸浓度并比较时，氧部分压力和血糖水平降低，乳酸水平增加。由于心肌片的分层，这些变化增加了。这表明在体外粘附的心肌板与血管组织结合在一起，从而导致连续的血管网络再生。实际上，观察到组织切片在心肌片中显示出类似管腔的结构，免疫染色证实了这些流体是用内皮血管细胞构建的。这些结果意味着，从动脉注入的培养液与活生物体，氧气和养分类似，将氧气和养分提供给包含分层心肌细胞片的组织，并从静脉中排出废物，从而确认了分层心肌细胞表中血管网络的重建。将来，我们将分析分层心肌片内的血管网络胚胎的过程，并为进一步的长期培养和优化培养条件开发生物反应器。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

心筋再生の現状と今後の展望

心肌再生的现状及未来展望

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
再生医療 4・3
影响因子：
0
作者：
Takehiro Miyasaka;Kosuke Endo;Seiichi Mochizuki;Kiyotaka Sakai;清水達也;Tatsuya Shimizu;清水達也
通讯作者：
清水達也

心筋に対する再生医療

心肌再生医学

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
臨床看護 32・8
影响因子：
0
作者：
Takehiro Miyasaka;Kosuke Endo;Seiichi Mochizuki;Kiyotaka Sakai;清水達也
通讯作者：
清水達也

Polysurgery of cell sheet grafts overcomes diffusion limits to produce thick, vascularized myocardial tissues

DOI：
10.1096/fj.05-4715fje
发表时间：
2006-01-01
期刊：
FASEB JOURNAL
影响因子：
4.8
作者：
Shimizu, T;Sekine, H;Okano, T
通讯作者：
Okano, T

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清水達也其他文献

Studying Large-scale Grain Producers in the Brazilian Midwest

研究巴西中西部的大型粮食生产商

DOI：
10.24765/latinamericareport.35.2_84
发表时间：
2019
期刊：
Latin America Report
影响因子：
0
作者：
Poole;Gregory S. & Takahashi;Hinako In Horiguchi;Sachiko;Imoto;Yuki;& Poole;Gregory S. Exploring Qualitative Approaches. Rotterdam: . pp. 85-102.;清水達也
通讯作者：
清水達也