Tannerella forsythensisにおけるバイオフィルム形成能の分析

福赛坦纳菌生物膜形成能力分析

基本信息

批准号：
17791374
负责人：
樋口直也
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は、コラーゲンタイプIV、ラミニン、フィブロネクチンにおいて、230kDa蛋白質と270kDa蛋白質が基質への付着に関与し、バイオフィルムの形成に関与している可能性があると考えられた。そこで本年度は、Porphyromonas gingivalis(P.g.)との共凝集について、230kDa蛋白質と270kDa蛋白質の関与を調べた。実験方法としては、菌株にはTanneralla forsythensis(T.forsythensis)標準株、230kDa蛋白質欠失変異株、270kDa蛋白質欠質変異株、230-270kDa蛋白質欠失変異株、P.gingivalis標準株を用いた。菌数をそろえて、P.g.単独、P.g.と各T.forsythensisの共培養に分け、96穴マイクロプレートにて培養した。96穴プレートは、(1)コラーゲンタイプIV、(2)ラミニン、(3)フィブロネクチンでコーティングされたもの3種類を使用した。培養、洗浄、染色後、染色剤を抽出した。吸光度(570nm)を測定し、細菌量を測定した。その結果、P.g.単独と、P.g.とT.forsythensis標準株の共培養には、どの基質においても検出菌量としては増加している傾向にあったが、有意な差は認められなかった。また、P.g.とT.forsythensis標準株の共培養と、P.g.とT.forsythensisの各変異株との共培養においては、有意な差は認められなかったものの、270kDa蛋白質の欠失で凝集がより多く起きている傾向にあった。今回の研究を通して、270kDa蛋白質は、基質への付着に関与し、P.g.への共凝集を阻害するように働くことが示唆されたが、試料数が少なかったため、さらに多くの試料を測定し、研究結果の再現性を確認していくことが必要であると思われる。

去年，人们认为有230 kDa和270 kDa蛋白参与底物附着，并且可能参与IV型胶原蛋白，层粘连蛋白和纤连蛋白的生物膜形成。因此，今年，我们研究了230 kDa蛋白和270 kDa蛋白与卟啉单胞菌的凝固性的参与（P.G.）。作为一种实验方法，菌株是标准的坦纳拉拉·福赛斯（T. Forsythensis），230 kDa蛋白缺失突变体，270 kDa蛋白缺失突变体，230-270 kDa蛋白缺失突变体和gingivalis标准菌株。分配了细菌计数，并共同培养的P.G.一个人，P.G。和T. forsythensis共培养，并在96孔微板岩中培养。将三种类型的96孔板与（1）IV型胶原蛋白，（2）层粘连蛋白和（3）纤连蛋白涂覆。培养，洗涤和染色后，提取染色剂。测量吸光度（570 nm），并测量细菌量。结果，有任何底物的检测量的趋势是P.G.的共培养物。独自一人和P.G.和T. forsythensis标准菌株以增加任何底物检测到的细菌量，但没有观察到显着差异。此外，尽管P.G.共培养之间没有观察到显着差异。和P.G.的T. Forsythensis标准菌株和共培养和T. forsythensis突变体，由于270 kDa蛋白的缺失，聚集的趋势更频繁。通过这项研究，提出270kDa蛋白与底物的附着相关并作用于抑制P.G.的凝聚，但是由于样品数量少，似乎有必要测量更多样品并确认研究结果的可重复性。