Tannerella forsythensisにおけるバイオフィルム形成能の分析

福赛坦纳菌生物膜形成能力分析

基本信息

批准号：
17791374
负责人：
樋口直也
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は、コラーゲンタイプIV、ラミニン、フィブロネクチンにおいて、230kDa蛋白質と270kDa蛋白質が基質への付着に関与し、バイオフィルムの形成に関与している可能性があると考えられた。そこで本年度は、Porphyromonas gingivalis(P.g.)との共凝集について、230kDa蛋白質と270kDa蛋白質の関与を調べた。実験方法としては、菌株にはTanneralla forsythensis(T.forsythensis)標準株、230kDa蛋白質欠失変異株、270kDa蛋白質欠質変異株、230-270kDa蛋白質欠失変異株、P.gingivalis標準株を用いた。菌数をそろえて、P.g.単独、P.g.と各T.forsythensisの共培養に分け、96穴マイクロプレートにて培養した。96穴プレートは、(1)コラーゲンタイプIV、(2)ラミニン、(3)フィブロネクチンでコーティングされたもの3種類を使用した。培養、洗浄、染色後、染色剤を抽出した。吸光度(570nm)を測定し、細菌量を測定した。その結果、P.g.単独と、P.g.とT.forsythensis標準株の共培養には、どの基質においても検出菌量としては増加している傾向にあったが、有意な差は認められなかった。また、P.g.とT.forsythensis標準株の共培養と、P.g.とT.forsythensisの各変異株との共培養においては、有意な差は認められなかったものの、270kDa蛋白質の欠失で凝集がより多く起きている傾向にあった。今回の研究を通して、270kDa蛋白質は、基質への付着に関与し、P.g.への共凝集を阻害するように働くことが示唆されたが、試料数が少なかったため、さらに多くの試料を測定し、研究結果の再現性を確認していくことが必要であると思われる。

去年，人们认为 IV 型胶原蛋白、层粘连蛋白和纤连蛋白的 230kDa 和 270kDa 蛋白参与对基质的粘附，并可能参与生物膜的形成。因此，今年，我们研究了 230kDa 和 270kDa 蛋白与牙龈卟啉单胞菌 (P.g.) 共聚集的参与情况。实验方法使用福赛坦纳氏菌（T. forsythensis）标准株、230kDa蛋白缺失突变株、270kDa蛋白缺失突变株、230-270kDa蛋白缺失突变株、牙龈卟啉单胞菌标准株。细菌数量均衡后，将其分为单独的P.g.和各T.forsythensis共培养，并在96孔微孔板中培养。使用三种类型的 96 孔板：涂有 (1) IV 型胶原蛋白、(2) 层粘连蛋白和 (3) 纤连蛋白的板。培养、洗涤、染色后，提取染色剂。测量吸光度（570 nm）以确定细菌的数量。结果，尽管所有底物中检测到的细菌数量均呈增加趋势，但单独培养 P.g. 和 P.g. forsythensis 标准菌株的共培养之间没有观察到显着差异。此外，虽然 P.g. 和 T. forsythensis 标准菌株的共培养以及 P. g. 和 T. forsythensis 的每个突变株的共培养之间没有观察到显着差异，但 270 kDa 蛋白的缺失引起了更多的聚集。倾向于保持清醒。通过本研究，推测270kDa蛋白质参与与基质的粘附，具有抑制与P.g的共凝集的作用，但由于样品数少，因此测定了更多的样品，因此有必要进行研究确认。结果的再现性。