唾液腺細胞分泌機能における低分子量GTP結合タンパク質の役割

低分子量 GTP 结合蛋白在唾液腺细胞分泌功能中的作用

基本信息

批准号：
17791331
负责人：
道家洋子
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791331/
关键词：
低分子量GTP結合タンパク質 Rho 開口分泌耳下腺

项目摘要

本研究の目的は、外分泌腺の一つ唾液腺の開口分泌の調節機構をRhoを中心に明らかにすることであった。そのために、1)Rhoが開口分泌に関与するか、2)RhoAの標的タンパク質のROCKは開口分泌に関与しているか、3)未知のRhoAの標的タンパク質はないか、を検討した。1、Rhoが開口分泌に関与しているかどうかを検討するため、Rhoの特異的阻害剤である、ボツリヌスC3外毒素のcAMP依存性のアミラーゼの分泌に対する影響を調査した。その結果ボツリヌスC3はcAMP依存性のアミラーゼの分泌を明らかに抑制した。この結果より、Rhoがラット耳下腺腺房細胞において、アミラーゼの開口分泌に関与していることが示唆された。2、RhoAの標的タンパク質であるROCKが開口分泌に関与しているか検討するためROCKの特異的阻害剤であるY-27632によるアミラーゼの影響を検討した。その結果、Y-27632がβアドレナリン受容体刺激依存性のアミラーゼの分泌を一部阻害すること確認した。このことよりROCKがアミラーゼの開口分泌に関与していることが示唆された。また、イムノブロットにより、ROCKの存在を確認している。3、またROCK以外にRhoの標的タンパク質を検索する目的で酵母two hybrid systemを用い、活性型RhoAに結合するものを検索した。その結果、プロテインキナーゼNが結合する可能性が示唆された。以上の結果より、ラット耳下腺腺房細胞において、Rhoがβアドレナリン受容体刺激によるアミラーゼの開口分泌に関与し、その下流には少なくともROCKが一部関与していることが示唆された。

这项研究的目的是阐明其中一种外分泌腺（主要是Rho）的调节分泌机制。为此，我们研究了1）是否参与口服分泌，2）是岩石，rhoA的靶蛋白，以及3）是否存在RhoA的未知靶蛋白。 1。为了研究Rho是否参与口服分泌，我们研究了RHO的特定抑制剂肉毒杆菌C3 Exotoxin对CAMP依赖性淀粉酶分泌的作用。结果，肉毒杆菌C3清楚地抑制了CAMP依赖性淀粉酶的分泌。这些结果表明，Rho参与大鼠腮腺腺泡细胞中淀粉酶的开放分泌。 2。为了研究Rhoa的靶蛋白岩是否参与口服分泌，研究了Y-27632的淀粉酶的作用，Y-27632是一种特定的岩石抑制剂。结果，已经证实Y-27632部分抑制了淀粉酶的分泌，这取决于β-肾上腺素受体刺激。这表明岩石参与了淀粉酶的开放分泌。此外，通过免疫印迹证实了岩石的存在。 3。除岩石外，还使用酵母两个杂种系统来搜索Rho的靶蛋白，并搜索与活性RhoA结合的靶蛋白。结果表明蛋白激酶N可能结合。上述结果表明，RHO通过刺激大鼠羊腹腺泡细胞中的β-肾上腺素能受体的开放分泌淀粉酶的开放分泌，并且至少岩石在其下游部分涉及部分。