ヒトES細胞による心筋発生・分化機構の解明と再生療法の開発

利用人ES细胞阐明心肌发育和分化机制以及再生疗法的发展

基本信息

批准号：
17790509
负责人：
高橋知之
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790509/
关键词：
ヒトES細胞心筋発生・分化再生療法

项目摘要

<研究の目的>これまでに、我々は胚性幹(ES)細胞による難治性循環器疾患の再生医療技術開発を目指したマウスES細胞における心筋分化誘導法(Kawai-T, Takahashi-T, et al.`04 Circ J.)、ならびにES細胞由来心筋分化細胞の同定・単離技術の開発を行ってきた。本研究は、マウスES細胞研究において培ってきた分化誘導法や目的細胞の同定・単離技術をヒトES細胞において応用する事によって、ヒトES細胞による再生医療技術開発を目的としている。<研究実績の概要>1)これまでの研究から、申請者らがマウスES細胞研究において開発した共培養系によって、ヒトES細胞から心筋分化誘導が可能である事を確認している。しかしながら、その分化誘導効率はマウスES細胞による心筋分化誘導率に比べて極僅かである事から、現在、マウスES細胞による分化誘導法を利用したスクリーニングを行う事で、様々な因子を利用したヒトES細胞による効率の良い心筋分化誘導法の開発を試みている。2)ヒトES細胞における技術開発の基盤となるマウスES細胞によって分化誘導した心筋分化細胞の同定・単離技術 (Adenoviral conditional targeting method : ACT法)を完成し、Nkx2.5遺伝子プロモーターによって同定・単離した心筋分化初期細胞の詳細な特性解析を行った(Takahashi-T, et al.'06 Mol Ther)。3)2)のマウスES細胞では有用性が確認できたACT法をヒトES細胞において応用する為に、ヒトES細胞に対する様々な遺伝子導入法の検討を行った。*以上の様に、ヒトES細胞の心筋分化誘導効率の改善に取り組み、ヒトES細胞における効率良い遺伝子導入技術を確認している。

<迄今为止，研究的目标>，我们开发了一种方法来诱导小鼠ES细胞中的心肌分化（Kawai-T，Takahashi-T，et al.04 Circ J.），旨在开发用于胚胎（ES）细胞（ES）细胞的耐火性心血管疾病的再生医学技术，以及用于识别细胞和隔离细胞的细胞。这项研究旨在通过应用分化诱导方法以及用于鉴定和隔离人类ES细胞中小鼠ES细胞中已培养的靶细胞的技术来开发使用人ES细胞的再生医学技术。 <研究结果概述> 1）先前的研究证实，申请人在小鼠ES细胞中开发的共培养系统可以诱导与人ES细胞的心肌分化。但是，由于与小鼠ES细胞的心肌分化诱导速率相比，分化诱导的效率非常小，因此我们目前正在尝试使用人ES细胞使用各种因素通过使用小鼠ES细胞分化诱导来开发有效的心肌分化诱导。 2）我们完成了由小鼠ES细胞分化的心肌分化细胞的腺病毒条件靶向方法（ACT方法），这是人类ES细胞中技术开发的基础，并通过NKX2.5基因启动子（takahashi-t，et et.'06 mol ther）鉴定并鉴定出心肌分化细胞的详细表征。 3）为了应用ACT方法，该方法在2）中被证实在小鼠ES细胞中有用，研究了人类ES细胞的各种基因转移方法。 *如上所述，我们正在努力提高诱导人ES细胞中心肌分化的效率，并确认人类ES细胞中有效的基因转移技术。