サイトカイン受容体の構造と情報伝達機構の分子機序に関する共同研究

细胞因子受体结构及信号转导机制分子机制合作研究

基本信息

批准号：
05044183
负责人：
吉村昭彦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for international Scientific Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

エリスロポエチン受容体の活性化機構を解明する目的でチロシンキナーゼ型受容体の細胞外ドメインとEPO受容体細胞内ドメインのキメラ分子を作成しその機能を解析した。その結果エリスロポエチン受容体はリガンドに依存した2量体化によって活性化され、その細胞内ドメインに増殖促進能、赤芽球系の分化誘導能およびチロシンりん酸化のシグナルを発生するのに必要十分な機能がそなわっていることを明らかにした。また欠失変異を導入し分化や増殖のシグナルに必須の領域はエリスロポエチン受容体細胞内ドメインの膜に近い約120アミノ酸の範囲にあることを明らかにした。また受容体のカルボキシ末端は増殖、分化のシグナル発生を減弱させる作用があることを明らかにし、フィンランドのグループによりヒト遺伝性赤血球増多症と深い関連があることが明らかにされた。今後これらのシグナルの実体を解明する必要がある。以上の研究からエリスロポエチン受容体の第二サブユニットはシグナル発生に必須ではないことが明らかとなった。そこで当初予定していた第二サブユニットのクローニングは必要でなくなった。次に受容体からのシグナルの最終標的を明らかにするためにサブトラクション法によってエリスロポエチンをはじめ各種サイトカインによって共通に活性化される遺伝子を数個クローニングした。これら活性化遺伝子は全く新規のものであり今後これらの遺伝子自身の機能と転写調節の機構を解明する予定である。これによって受容体から遺伝子に至る情報の流れが明確になると思われる。なお当初予定していたTGF-β受容体の解析は時間的な制約もあり思うような成果をあげられなかった。

为了阐明促红细胞生成素受体的激活机制，我们构建了酪氨酸激酶受体胞外域和EPO受体胞内域的嵌合分子，并分析了其功能。结果表明，促红细胞生成素受体通过配体依赖性二聚化而被激活，其细胞内结构域含有促进增殖、诱导红系分化、产生酪氨酸磷酸化信号所必需且充分的信号。此外，通过引入缺失突变，我们发现分化和增殖信号所必需的区域位于靠近促红细胞生成素受体细胞内结构域膜的约120个氨基酸的范围内。还揭示该受体的羧基末端具有减弱增殖和分化信号产生的作用，芬兰的一个研究小组揭示其与人类遗传性红细胞增多症密切相关。未来有必要阐明这些信号的真实性。上述研究表明，促红细胞生成素受体的第二亚基对于信号产生并不是必需的。因此，原本计划的第二个亚基的克隆就不再需要了。接下来，为了明确受体信号的最终目标，我们使用扣除方法克隆了几个通常被各种细胞因子（包括促红细胞生成素）激活的基因。这些激活的基因是全新的，我们计划在未来阐明这些基因本身的功能以及转录调控的机制。这有望阐明从受体到基因的信息流。由于时间限制，原计划的 TGF-β 受体分析未能产生预期结果。