α-ジカルボニル構造切断活性を有する食品の開発と応用

具有α-二羰基结构裂解活性的食品的开发与应用

基本信息

批准号：
15700469
负责人：
松浦信康
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Okayama University of Science (2004)Toyama Prefectural University (2003)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

α-ジカルボニル化合物は、食品加工時および生体内特殊環境下において生成することが知られており、我々の健康・生命に関わる反応を引き起こしている。生体内外において発生するα-ジカルボニル化合物と、アミノ酸もしくはタンパク質内アミノ基との非酵素的反応(Maillard反応)によって生成する物質群は、発ガン・糖尿病発症など我々の健康をおびやかすことが明らかになってきた。そこで本研究では、α-ジカルボニル構造切断活性を有する食品抽出液の探索を目的として、研究を開始した。α-ジカルボニル構造モデル化合物である1-phenyl-1,2-propanedione (PPD)を基質として、リン酸緩衝液中、様々な食品抽出液と混合し37℃において切断反応を行った。切断時に生成するbenzoic acid (BA)を、高速液体クロマトグラフィーを用いて定量し、切断活性を評価した。その結果、ユズ水蒸気蒸留抽出物にタンパク質架橋切断活性が認められた。またELISA法を用いたタンパク質レベルにおける架橋切断活性についても評価を行った。96well multiwell plateにコラーゲンを固相化した。その後、別途調製したAGE (advanced glycation endproducts)化牛血清アルブミン(BSA)を各wellに添加し、α-ジカルボニル化合物に依存するタンパク質結合体を調製した。そのwellにユズ抽出液を添加し、incubationを行い、a-ジカルボニル構造切断活性に基づく、BSA遊離反応を行った。残存、AGEs化BSA量を、抗BSA抗体を用いたEILSA法にて定量を行った。その結果、ユズ抽出液には、タンパク質レベルにおいても、α-ジケトン構造を切断する活性化あることを確認した。現在含有成分の活性について検討を行っている。

众所周知，α-二羰基化合物是在食品加工过程中和生物体的特殊环境中产生的，它们会引起影响我们健康和生活的反应。现已明确，体内外存在的α-二羰基化合物与蛋白质中的氨基酸或氨基发生非酶促反应（美拉德反应）产生的一组物质对我们的健康构成威胁，包括癌症和糖尿病的发展已经成为。因此，在本研究中，我们开始研究，旨在寻找具有α-二羰基结构裂解活性的食物提取物。我们使用α-二羰基结构模型化合物1-苯基-1,2-丙二酮（PPD）作为底物，将其与各种食品提取物在磷酸盐缓冲液中混合，并在37°C下进行裂解反应。使用高效液相色谱对裂解过程中产生的苯甲酸（BA）进行定量，以评估裂解活性。结果，在水蒸气蒸馏的柚子提取物中观察到蛋白质交联裂解活性。我们还使用 ELISA 评估了蛋白质水平的交联裂解活性。将胶原蛋白固定在 96 孔多孔板上。此后，将单独制备的AGE(晚期糖基化终产物)牛血清白蛋白(BSA)添加到每个孔中以制备依赖于α-二羰基化合物的蛋白缀合物。将柚子提取物添加到孔中，进行孵育以进行基于α-二羰基结构裂解活性的BSA释放反应。使用抗BSA抗体通过EILSA法对转化为AGE的剩余BSA的量进行定量。结果证实，柚子提取物甚至在蛋白质水平上也具有裂解α-二酮结构的活性。我们目前正在调查所含成分的活性。