昆虫の生理機能調節にかかわるインドールアミン代謝系の役割とその撹乱による害虫防除法の開発

吲哚胺代谢系统在调节昆虫生理功能中的作用及扰乱其害虫防治方法的发展

• 批准号: 04F04465
• 负责人: 竹田 真木生
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04465/
• 关键词: メラトニン; N-アセチル転移酵素; 概日振動; 光周性; Periplaneta americana; Dianemobius nigrofasciatus; Athalia rosae; メラトニン受容体; 概日リズム; 免疫組織化学; メラトニンレセプター; N-acetyltransferase; ワモンゴキブリ; period; インドールアミン代謝系; メラトニン; N-アセチル転移酵素; 概日振動; 光周性; Periplaneta americana; Dianemobius nigrofasciatus; Athalia rosae; メラトニン受容体; 概日リズム; 免疫組織化学; メラトニンレセプター; N-acetyltransferase; ワモンゴキブリ; period; インドールアミン代謝系

1.ワモンゴキブリ(Periplaneta americana)のインドールアミンN-アセチル転移酵素(NAT)の遺伝子クローニングとタンパク質の構造解析を行い、脳内における発現部位を免疫組織化学を用いておこなった。NATは視葉以外では、PERIOD (PER), DOUBLE TIME (DBT)と同神経細胞に局在した。2.次に、メラトニン受容体遺伝子をクローニングした。このメラトニン受容体はG-タンパク質協働型膜蛋白質で、抗体を用いた局在性の探索の結果、脳のすべての箇所で、PER/DBT細胞と共存した。以上の結果は、インドールアミンと概日時計は極めて密接な機能相関を示唆している。メラトニンが概日時計の出力に関るか、概日時計要素を含んだ複数の神経細胞間の内的な同調にかかわるかいずれかであろう。3.概日振動と光周性の良いモデル系であるマダラスズ(Dianemobius nigrofasciatus) Cycle遺伝子をクローニングした。同様に、転写制御因子であるCLOCK遺伝子もクローニングし、発現パターンと局在を明らかにした。CYCとCLKは一部の細胞で共存したが、別の細胞では、別々に発現する。また、CLKの核内移行の証拠も確認した。大きな卵であるので、RNA interferenceのための良いモデル系である。これまでに、PER, TIM, CYC, CLKを本種でクローニングと発現パターの解析がおこなわれたので、これから、ここの遺伝子のかかわりを光周性という局面で解析する基盤が整備されつつある。4.カブラハバチ(Athalia rosae)から転写調節因子であるCYCLEの遺伝子をクローニングし、発現パターンと発現部位を調べた。本種は、卵巣から取り出した卵が、水につけられると雄として発生するし、大きな卵であるので、RNA interferenceのための良いモデル系である。そこではじめての時計遺伝子がクローニングされたことにより、RNAiへの出発点が開かれた。

1。对哺乳动物蟑螂（Americana Periplaneta）的吲哚胺N-乙酰转移酶（NAT）的基因克隆进行了，并对蛋白质进行了结构分析，并使用免疫组织化学进行了大脑中的表达位点。除了视线叶，NAT还将其本地定位于同时（PER）和双倍时间（DBT）。 2。然后克隆褪黑激素受体基因。该褪黑激素受体是一种G蛋白合作膜蛋白，由于使用抗体进行定位搜索，它与大脑各个部位的Per/DBT细胞共存。以上结果表明，吲哚胺和昼夜节律时钟是高度功能相关性的。褪黑激素可能参与昼夜节律的输出，或者在包含昼夜节律元素的多个神经元之间进行内部调节。 3。戴安诺比乌斯·尼格法斯库斯（Dianemobius nigrofasciatus）的循环基因是一种模型系统，具有良好的昼夜节律振荡和光层性。同样，将转录调节器时钟基因克隆为揭示其表达模式和定位。 CYC和CLK在某些细胞中共存，但在其他细胞中分别表示。我们还证实了CLK核易位的证据。因为它是一个大鸡蛋，所以它是RNA干扰的良好模型系统。到目前为止，Per，Tim，CYC和CLK的克隆以及对表达推杆的分析已在该物种中进行，并且正在开发基础来分析光周期中基因的关系。 4。转录调节循环的基因是从蜜蜂（Athalia rosae）克隆的，并检查了表达模式和表达位点。该物种是RNA干扰的好模型，因为从卵巢中提取的卵在水中浸泡在水中并是大鸡蛋时会形成雄性。第一个时钟基因被克隆到那里，为RNAi打开了起点。