卵巣癌の腹膜転移形成における細胞膜型アミノペプチダーゼの役割と遺伝子治療への応用

细胞膜氨肽酶在卵巢癌腹膜转移形成中的作用及其在基因治疗中的应用

基本信息

批准号：
15790885
负责人：
梶山広明
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790885/
关键词：
卵巣癌 DPPIV CD26 腹膜播種転移浸潤薬剤感受性 APN CD13 抗がん剤形態変化浸潤 NEP エンドセリン-1

项目摘要

今年度は主として細胞表面ペプチド分解酵素としてアミノペプチダーゼN(APN/CD13)の卵巣癌における発現と機能解析を行った。研究計画にあるように手術検体や細胞株におけるAPN/CD13の発現を免疫組織染色にて確認した。その結果、高APN/CD13発現細胞では線維芽細胞様形態が強く高浸潤性、低DPPIV/CD26発現であった。逆に低APN/CD13発現細胞では逆に上皮細胞様形態が強く低浸潤性、高DPPIV/CD26であることが確認できた。すなわち同じ細胞膜型アミノペプチダーゼでありながらAPN/CD13とDPPIV/CD26が細胞形態、細胞骨格、及び浸潤性の獲得で全く正反対の機能を有しているのは興味深い事柄である。さらに特筆すべきことは、低DPPIV/CD26高APN/CD13発現株(SKOV-3)へDPPIV/CD26を過剰発現させると興味深いことながらDPPIV/CD26発現の増加と共にAPN/CD13発現は著明に減少し線維芽細胞様形態から上皮細胞様に形態シフトし(EMT ; epithelia-mesenchymal transition)、かつEカドヘリンの発現増強が認められた。逆に低DPPIV/CD26高APN/CD13発現株(ES-2)のAPN/CD13をsmall interfering RNA (siRNA)を用いて抑制すると細胞形態において線維芽細胞様から上皮細胞様へとスイッチが認められた(MET ; mesenchymal-epithelial transition)。さらにsi-CD13-ES-2細胞ではコントロール細胞に比較して増殖能、浸潤能、および運動能などが減弱していた。さらに初代培養した中皮細胞との接着をみたadhesion assayにおいてもコントロール細胞に比較して有意にsi-CD13-ES-2細胞では接着が減弱していた。このことからDPPIV/CD26とAPN/CD13は細胞内でEMTあるいはMETに関連しながら密接にリンクしながら転移・浸潤性の獲得に影響していることが示唆された。

今年，我们分析了氨基肽酶N（APN/CD13）作为卵巢癌中细胞表面肽降解酶的表达和功能分析。如研究设计中所述，通过免疫组织化学染色证实了APN/CD13在手术标本和细胞系中的表达。结果，表达高APN/CD13的细胞具有强烈的成纤维细胞样形态和高侵入性和低DPPIV/CD26表达。相反，已经证实，在表达低APN/CD13的细胞中，上皮细胞样形态具有强烈的缺乏症和高度DPPIV/CD26。也就是说，有趣的是，尽管是相同的细胞膜氨基肽酶，APN/CD13和DPPIV/CD26在实现细胞形态，细胞骨架和侵袭性方面具有完全相反的功能。 What is even more noteworthy is that overexpressing DPPIV/CD26 into a low-DPPIV/CD26 high APN/CD13 expression strain (SKOV-3) is interesting, with increasing DPPIV/CD26 expression, APN/CD13 expression significantly decreased, resulting in a morphological shift from fibroblast-like morphology to epithelial-like transition (EMT; epithelia-mesenchymal transition), E-钙粘蛋白的表达得到了增强。相反，当使用小的干扰RNA（siRNA）抑制低dppiv/CD26中高APN/CD13表达菌株（ES-2）中的APN/CD13时，观察到从成纤维细胞样到细胞形态学的上皮样细胞的开关（Met; MESECLESERPERPHOLOGY; sEseplymal-上皮 - 上皮过渡）。此外，与对照细胞相比，SI-CD13-ES-2细胞减弱了增殖能力，侵入性能力和运动能力。此外，与对照细胞相比，在Si-CD13-ES-2细胞中，粘附测定显示与原代培养的间皮细胞粘附，在Si-CD13-ES-2细胞中显着减弱。这表明DPPIV/CD26和APN/CD13紧密相连，并影响转移和侵入性的获取。