造血器悪性腫瘍の抗癌剤、放射線治療抵抗性の分子機構解析と分子標的療法の開発

造血系统恶性肿瘤抗癌药物及放疗耐药的分子机制分析及分子靶向治疗的发展

• 批准号: 15790485
• 负责人: 近藤 健
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790485/
• 关键词: チェックポイント; Cdt1; ユビキチン; DNA損傷; アポトーシス

1)DNA損傷チェックポイントの標的分子の同定DNA損傷時に活性化されるチェックポイントの標的分子を検索したところ、DNA複製制御因子Cdt1が同定された。Cdt1はDNA複製のためのPre-replication Complex形成に必須の分子であることが報告されていたが、細胞が放射線照射や紫外線照射といったDNA損傷を受けると、直ちにCdt1が分解されることが判明した。Cdt1の分解はproteasome inhibitorによって完全に阻害され、Cdt1はDNA損傷時にユビキチン・プロテアゾーム系で分解されることが判明した。2)Cdt1の分解を誘導するシグナル伝達機構DNA損傷時にはataxia telangiectasia mutated(ATM)/ATM-related kinase(ATR)が損傷のsensorとして機能することが知られているが、ATM/ATRの機能はカフェインで抑制される。Cdt1の分解に関してカフェイン感受性のシグナルの有無を検討したところ、Cdt1の分解には、カフェインによって抑制されるシグナルと、抑制されないシグナルが存在し、紫外線照射ではカフェイン感受性シグナル、放射線照射ではカフェイン非感受性シグナルが働いていることを明らかにした。3)Cdt1のユビキチン化に関与するE3 ubiquitin ligase紫外線照射によるDNA損傷時にCdt1はリン酸化され、Cdt1のリン酸化はE3ユビキチンリガーゼSCF^<Skp2>への会合を引き起こすことを明らかにした。更にSCF^<Skp2>はCdt1をユビキチン化することが判明した。これまでにCdt1を過剰発現することでチェックポイントキナーゼであるChk1依存性にアポトーシスを誘導できることを明らかにしており、Cdt1を制御することで効果的に癌細胞にアポトーシスを誘導できる可能性があることが示唆された。

1）在搜索目标分子以识别DNA损伤检查点的靶分子以识别在DNA损伤过程中激活的检查点时，鉴定了DNA复制调节剂CDT1。据报道，CDT1是形成用于DNA复制的预复合复合物的必不可少的分子，但是发现当细胞受到辐射或紫外线照射等DNA损伤时，CDT1立即降解。蛋白酶体抑制剂完全抑制了CDT1的降解，发现CDT1在DNA损伤后被泛素 - 蛋白酶体系统降解。 2）诱导CDT1降解的信号转导机制已知teleantaicectia突变（ATM）/ATM相关激酶（ATR）在DNA损伤过程中起损伤的传感器，但ATM/ATR的功能被咖啡因抑制。 When we investigated the presence or absence of a caffeine-sensitive signal for degradation of Cdt1, we revealed that there are signals suppressed by caffeine and unsuppressed signals for degradation of Cdt1, and that caffeine-sensitive signals are at work when ultraviolet irradiation is performed, and caffeine-insensitive signals are at work when irradiation is performed. 3）参与CDT1泛素化的E3泛素连接酶表明，通过紫外线照射，CDT1在DNA损伤时被磷酸化，并且CDT1的磷酸化导致与E3泛素蛋白小酶SCF^<SKP2>的磷酸化。此外，发现cdt1的scf^<skp2>。到目前为止，已经揭示了过表达的CDT1可以以检查点激酶CHK1依赖性方式诱导凋亡，这表明控制CDT1可以有效地诱导癌细胞中的凋亡。