樹状細胞におけるIL-6依存性MHCcllassII分子の発現制御

树突状细胞中 IL-6 依赖性 MHCcllassII 分子表达的调节

• 批准号: 15790209
• 负责人: 北村 秀光
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790209/
• 关键词: 樹状細胞; MHCクラスII; 抗原提示細胞; 自然免疫; 獲得性免疫; リソソーム; プロテアーゼ; カテプシン; IL-6; gp130; MHC class II; STAT3

抗原提示細胞内においてMHCクラスII分子の制御は、自然免疫のみならず獲得性免疫系の賦活化にとって重要である。本研究で、インターロイキン6(IL-6)とそのシグナル伝達による樹状細胞のMHCクラスII分子(MHCII)発現について検討した。C57BL/6マウス骨髄由来DC(BMDC)をIL-6で処理すると、DC中のMHCII α,β-dimerの総量が処理時間依存的に減少した。そこでIL-6のレセプターであるgp130分子内のチロシン残基をフェニールアラニンに置換した変異gp130を発現するBMDCを用いたところFxxQ BMDCでは、MHCIIの減少は見られず、F759 BMDCでは、より強く減少した。これらのことからIL-6によるMHCII α,β-dimer量の減少にはgp130を介するSTAT3の関与が強く示唆された。さらにこれらの原因因子を同定するために、MHCII分子のプロセッシングと深い関係があるリソソームプロテアーゼ、cathepsin(cat.)に着目した。F759 BMDCをIL-6で処理することでcat. B, Lの遺伝子レベルおよびcat. Lの蛋白レベルの増加を確認した。またin vitro系で酵素活性を測定したところ、cat. L, Sの活性が増加することを確認した。さらにcat.Sの遺伝子をレトロウイルス法により、BMDCに強制発現させたところ、細胞内MHCII分子の低下、LPS刺激による細胞表面でのMHCII発現増強を阻害した。以上の実験からIL-6がDCのプロテアーゼを賦活化する作用を持つこと、DC内のMHCII α,β-dimer量を減少させることが分かった。またDCをIL-6処理することでLPS刺激による細胞表面へのMHCIIの発現増強が阻害されることから、獲得性免疫系の賦活化に対してもIL-6は影響することが示唆された。

抗原呈递细胞内 MHC II 类分子的控制不仅对于激活先天免疫而且对于适应性免疫系统的激活都很重要。在这项研究中，我们研究了白细胞介素 6 (IL-6) 及其信号转导导致的树突状细胞中 MHC II 类分子 (MHCII) 的表达。当用IL-6处理C57BL/6小鼠骨髓源性DC（BMDC）时，DC中MHCII α,β-二聚体的总量以处理时间依赖性方式减少。因此，当我们使用表达突变gp130的BMDC（其中gp130分子中的酪氨酸残基（IL-6受体）被苯丙氨酸取代时），在FxxQ BMDC中没有观察到MHCII的减少，并且在FxxQ BMDC中观察到更强的减少。 F759 BMDC 做到了。这些结果强烈表明 STAT3 通过 gp130 参与 IL-6 诱导的 MHCII α,β-二聚体水平的降低。为了进一步确定这些致病因素，我们重点关注组织蛋白酶 (cat.)，这是一种与 MHCII 分子加工密切相关的溶酶体蛋白酶。通过用 IL-6 处理 F759 BMDC，我们证实了 cat B 和 L 基因水平以及 cat L 蛋白水平。此外，当在体外系统中测量酶活性时，证实了cat的活性增加。此外，当使用逆转录病毒方法强制BMDCs表达cat.S基因时，会导致细胞内MHCII分子减少，并抑制LPS刺激诱导的细胞表面MHCII表达增强。上述实验表明，IL-6具有激活DC中蛋白酶的作用，并减少DC中MHCII α,β-二聚体的量。此外，IL-6处理DC抑制了LPS刺激诱导的细胞表面MHCII表达的增强，表明IL-6也影响适应性免疫系统的激活。