腫瘍内浸潤リンパ球に対するCD3抗体刺激および凍結保存の影響とその臨床応用

CD3抗体刺激和冻存对瘤内浸润淋巴细胞的影响及其临床应用

基本信息

批准号：
03670774
负责人：
田中憲一
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670774/
关键词：
腫瘍内浸潤リンパ球抗CD3抗体抗癌免疫療法化学療法

项目摘要

固層化CD3抗体刺激によるTILの影響培養初期に抗CD3抗体5mcg/ml にて1週間刺激を行ない、増殖能、細胞表面マ-カ-、抗腫瘍活性について検討を行なった。CD3抗体刺激を行なったTILは培養4週間で10^3〜10^4の増殖を示し、刺激無しの症例と比較すると10〜50倍の増加した増殖能を示した。細胞表面マ-カ-の検索を行なったところ、無刺激群ではCD4、CD8抗原陽性細胞が混在するのに反し、CD3刺激群では培養2週間で大多数の症例がCD8抗原陽性のリンパ球で占められた。一方インビトロの抗腫瘍活性においては、刺激群にやや亢進した細胞障害が観察された。凍結、融解を行なったTILの解析増殖したリンパ球を凍結保存し、化学療法の副作用より回復後TILの投与を行なうプロトコ-ルを実施するための基礎的検討を行なった。培養リンパ球に7%DMSOを加え、プログラミングフリザ-にて凍結、液体窒素中に保存した。融解前後のTILで増殖能、細胞表面マ-カ-、細胞障害性について検討を行なったところ、すべてにおいて著明な差は認めなかった。唯一の欠点とすれば、回収率が66%という凍結時の細胞の損失であるが、培養初期の固層化CD3抗体刺激によりこの損失は補充可能であると思われる。まとめ現状において、TIL単独で再発癌、進行期癌を根治させる事は困難と思われ、照射、化学療法との併用によるアジュバント的な治療法として用いられるべきと思われる。両者の適切な投与スケジュ-ルとしては、すべての化学療法が終了した時点で凍結保存したTIL投与を行なう方法が望ましいと思われる。基礎実験の結果より、凍結保存後もTILは十分に増殖を示し、細胞障害性においても変化を示さず、臨床応用可能と思われる。今後は症例の集積により長期予後の詳細な観察を行ない、より効果的な投与法の検討を行なっていく予定である。

固定化CD3抗体刺激对TILs的影响培养初期用抗CD3抗体5μg/ml刺激1周，检测增殖能力、细胞表面标志物和抗肿瘤活性。经过CD3抗体刺激的TIL在培养4周后显示出10^3至10^4的增殖，与未刺激的情况相比，显示出增殖能力增加10至50倍。当我们寻找细胞表面标志物时，我们发现，在未刺激组中，存在CD4和CD8抗原阳性细胞的混合，但在CD3刺激组中，经过2次刺激后，大多数情况下是CD8抗原阳性淋巴细胞。文化周。另一方面，关于体外抗肿瘤活性，在刺激组中观察到细胞损伤略有增强。冷冻和解冻 TIL 的分析我们进行了一项基础研究，以实施一项方案，其中增殖的淋巴细胞被冷冻保存，并在化疗副作用恢复后施用 TIL。将7% DMSO添加到培养的淋巴细胞中，在编程冰箱中冷冻，并储存在液氮中。当我们检查解冻前后TIL的增殖能力、细胞表面标志物和细胞毒性时，均未观察到显着差异。唯一的缺点是冷冻过程中细胞的损失，恢复率为66%，但这种损失似乎可以通过在培养早期用固定化CD3抗体刺激来补充。总结目前，单用TIL似乎很难彻底治愈复发癌症或晚期癌症，应与放疗和化疗联合作为辅助治疗。至于两者的适当给药方案，最好在所有化疗完成后给予冷冻 TIL。基础实验结果表明，TIL在冷冻保存后仍能充分增殖，且细胞毒性无变化，可用于临床。未来，我们计划通过积累更多病例，对长期预后进行详细观察，并考虑更有效的给药方法。