転写因子による神経系細胞アポトーシス阻害機構の解析

转录因子抑制神经系统细胞凋亡的机制分析

基本信息

批准号：
14780583
负责人：
浜之上誠
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Toho University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780583/
关键词：
NF-kappaB オリゴデンドロサイトアポトーシス p38 MAPキナーゼ JNK NF-κB

项目摘要

Nuclear factor kappa beta(NF-kappaB)は中枢神経系細胞に広く存在し、神経細胞のアポトーシスを強力に阻害する転写因子の一つであることが知られている。オリゴデンドロザイト(OLG)においては、NF-kappaBの活性化が様々な侵害刺激により誘導されるという知見から、アポトーシスとの関連性が示唆されていたが詳細は不明であった。そこで培養OLG株化細胞(CG-4細胞)を用いて分子生物学的・生化学的にNF-kappaBとアボトーシスとの関連性を解析した。NF-kappaB発規プラスミドをCG-4細胞に導入し安定発現株を樹立し、腫瘍壊死因子(TNF-alpha)によりアポトーシスを誘導した。NF-kappaBを発現させたCG-4細胞はアポトーシスに対して著明な抵抗性を示し、その抵抗性はNF-kappaBの阻害蛋白であるI-kappaBの同時発現により消失した。以上の実験結果はNF-kappaBのOLGにおける機能を明らかにしているばかりでなく、その強力なアポトーシス阻害活性が脱髄疾患の治療および機能再生に応用できる可能性を示唆しており、詳細を国際英文誌に発表した。さらにその後NF-kappaBの抗アポトーシス活性作用機序の解明を進めたところ、NF-kappaB発現細胞においてGadd45beta発現量増大とc-Jun amino-terminal kinases(JNK)活性化抑制を確認した。この結果は、NF-kappaBによるアポトーシス抵抗性が、JNK依存性経路を介している可能性を示唆するものであり、現在さらに詳細な解析を続けている。

核因子kappa beta（NF-kappab）广泛存在于中枢神经系统细胞中，已知是强烈抑制神经元细胞凋亡的转录因子之一。在寡头胶酶（OLG）中，各种伤害性刺激引起NF-kappab的激活提示与细胞凋亡的联系，但细节尚不清楚。因此，我们使用培养的OLG细胞（CG-4细胞）分析了NF-kappab和空白的分子生物学和生化关系。将NF-kappab发育质粒引入CG-4细胞中以建立稳定的表达菌株，并通过肿瘤坏死因子（TNF-Alpha）诱导凋亡。表达NF-kappab的CG-4细胞表现出对凋亡的显着耐药性，并且通过i-kappab的共表达消除了耐药性，i-kappab是NF-kappab的抑制蛋白。上述实验结果不仅揭示了NF-kappab在OLG中的功能，而且还表明其有效的凋亡抑制活性可以应用于脱髓鞘疾病和功能再生的治疗，并在国际英语期刊上发表了细节。此外，我们继续阐明NF-kappab的抗凋亡活性的机制，并确认GADD45BETA表达水平升高，而C-Jun氨基末端激酶（JNK）在NF-kappab表达的细胞中抑制了C-Jun氨基末端激酶（JNK）激活。该结果表明，NF-kappab引起的凋亡的抗性可能是通过JNK依赖性途径进行的，目前正在进行进一步的详细分析。