Examining the mechanisms through which GLP-1 receptor agonists ameliorate the secondary injury process of spinal cord injury

检查 GLP-1 受体激动剂改善脊髓损伤继发性损伤过程的机制

• 批准号: 21K09238
• 负责人: 加藤 裕幸
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09238/
• 关键词: 脊髄損傷; 二次障害; 小胞体ストレス; エキセナチド; オリゴデンドロサイト前駆細胞; RNAシーケンシング; GLP-1受容体作動薬; アポトーシス

GLP-1受容体作動薬エキセナチドの投与により小胞体ストレスに対し細胞保護的に働くGRP78が増加し， pro-apoptotic transcription factorであるCHOPが抑制されたことから，エキナセチドは小胞体ストレス応答を増強しアポトーシスを抑制することで下肢運動機能を改善することを報告した．エキセナチド投与により抗炎症/組織修復に関与するM2マクロファージが有意に増加し，炎症/組織傷害に関連するM1が損傷後に有意に低下していたことから，エキセナチドがマクロファージの極性転換を誘導することも確認した．更に RT-PCRによりTNFα ，IL-1β等の炎症性サイトカインが減少し，IL-4，IL-10の抗炎症性サイトカインが上昇することを確認した．血液脳脊髄関門に対する検討を行うために，損傷後にEvans Blueを頚静脈内に投与して脊髄内に析出した色素量を分光光度法で測定した．損傷後48時間で色素漏出がエキナセチド投与群で有意に低く， tight JunctionタンパクZo-1, claudin-5の発現がエキセナチド群において有意に高かった．エキセナチド投与群において損傷後14日のLFB染色で髄鞘が有意に保護されており，オリゴデンドロサイト前駆細胞の数が対照群より有意に高かった．オリゴデンドロサイトへの分化や再髄鞘化を確認するため，損傷後24時間と48時間にBrdUを腹腔内投与し，損傷後7日，14日，28日の脊髄でBrdUに標識されたオリゴデンドロサイト前駆細胞とオリゴデンドロサイト数の定量を進めている．また並行して，RT-PCRによる小胞体ストレスに関わるsignal pathwayを検討するため，損傷後24時間の脊髄をエキセナチド投与群・対照群から摘出し，RNAシーケンシングを実施し，その結果を解析中である．

GLP-1受体激动剂艾塞那肽的给药增加了GRP78，它是对内质网应激的细胞保护剂，并抑制了Chop，这是一种促凋亡的转录因子，并报道了Echinacetide通过增强脑肿瘤应力响应和抑制的APOPTOSIS来改善下肢运动功能。我们还证实，艾替尼给药可显着增加参与抗炎/组织修复的M2巨噬细胞的数量，并且与炎症/组织损伤相关的M1显着减少了损伤后。此外，RT-PCR证实，炎症细胞因子（如TNFα和IL-1β）降低，并增加了抗炎细胞因子，例如IL-4和IL-10。为了研究血红脊髓屏障，损伤后将埃文斯蓝施用到颈静脉中，并通过分光光度法测量脊髓中沉淀的色素量。在受伤后48小时内，棘甲二烯组的颜料泄漏显着降低，并且艾塞那肽组紧密连接蛋白ZO-1和Claudin-5的表达明显更高。在艾鉴定组中，损伤后14天进行LFB染色表明，髓磷脂受到了显着保护，并且少突胶质细胞前体细胞的数量显着高于对照组。为了确认分化为少突胶质细胞和透明化，受伤后的24和48小时腹膜内进行了腹膜内，并定量确定少突胶质细胞前体细胞的数量和少突胶质细胞在7th，14th和14th和28 the的脊柱脊柱中标记为BRDU。此外，同时，为了研究由RT-PCR引起的内质网应激所涉及的信号途径，从经埃纳代肽治疗组和对照组中除去脊髓，并进行了RNA测序，并进行了RNA测序，并分析了结果。

项目成果

脊髄損傷における小胞体ストレスの関与とその制御

内质网应激在脊髓损伤中的参与及其调控

• 发表时间: 2022
• 作者: 高藤義正;河尾直之; 奥本 勝美; 大平宇志; 水上優哉; 城潤一郎; 田畑泰彦; 梶博史;加藤 裕幸，野村 慧，野口 俊洋，岡田 慶子，服部 伸昭，渡辺 雅彦
• 通讯作者: 加藤 裕幸，野村 慧，野口 俊洋，岡田 慶子，服部 伸昭，渡辺 雅彦

脊髄損傷ラットにおけるGLP-1受容体作動薬のマクロファージ極性と血液脳脊髄関門への作用の検討

GLP-1受体激动剂对脊髓损伤大鼠巨噬细胞极性和血脑脊髓屏障的影响

• 发表时间: 2020
• 作者: Sadatsuki Ryo;Ishijima Muneaki;Kaneko Haruka;Liu Lizu;Futami Ippei;Hada Shinnosuke;Kinoshita Mayuko;Kubota Mitsuaki;Aoki Takako;Takazawa Yuji;Ikeda Hiroshi;Okada Yasunori;Kaneko Kazuo;小関弘展，松林昌平，尾﨑 誠;山口慶子，加藤裕幸，野口俊洋，渡辺雅彦
• 通讯作者: 山口慶子，加藤裕幸，野口俊洋，渡辺雅彦