チロシンホスファターゼによるサイトカインシグナル伝達の抑制機構

酪氨酸磷酸酶抑制细胞因子信号传导的机制

基本信息

批准号：
14780485
负责人：
田沼延公
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

PTPεCは、我々がクローニングした細胞質型チロシンホスファターゼで、その機能として、これまでに、サイトカイン受容体からのシグナル伝達を担うJAK-STAT経路に対する選択的抑制能を見出している。サイトカインは、細胞のがん化やがん形質の維持とも密接に関連している。前年度において、白血病細胞の腫瘍原性におよぼすPTPεC遺伝子導入の効果を検討したところ、マウス生体内におけるM1白血病細胞の腫瘍原性が、PTPεCの遺伝子導入により著しく減少することを見出した。そこで、PTPεCによる腫瘍抑制機序の検討したところ、実験的転移モデルを用いた実験において、PTPεCが、転移後きわめて初期の細胞増殖、あるいは転移そのものを抑制することが示唆された。その抑制作用には、PTPeCのホスファターゼ活性が必須であることがわかった。また、PTPεCの機能を個体レベルで解析することを目的として、野生型または不活性変異型PTPεCを血球細胞特異的に強発現するトランスジェニックマウスの作製を行った。しかし、残念ながら、PTPεCを高発現する系統は、維持できないことがわかった。PTPεCの新たな基質タンパク・結合タンパクを同定する目的で、野生型または不活性変異型PTPεCを構成的に発現させた白血病細胞を用いて生化学的な精製を行ったところ、いくつかのチロシンリン酸化タンパクが、不活性変異型特異的に結合することがわかった。現在、それらタンパクの同定を行っている。

PTPεC是我们克隆的一种细胞质酪氨酸磷酸酶，到目前为止，它已经发现其对JAK-STAT途径的选择性抑制能力，该途径负责来自细胞因子受体的信号传导。细胞因子也与细胞癌和癌症性状的维持密切相关。在上一年，我们研究了PTPεC基因转移对白血病细胞肿瘤的影响，并发现通过PTPεC基因转移显着降低了M1白血病细胞在小鼠体内的肿瘤性。因此，当我们研究了PTPεC抑制肿瘤的机制时，建议在使用实验转移模型的实验中，PTPεC在转移或转移本身后很早就抑制细胞增殖。发现PTPEC的磷酸酶活性对于其抑制作用至关重要。此外，为了分析PTPεC在单个水平上的功能，以血细胞特异性方式强烈地表达野生型或非活性突变体PTPεC的转基因小鼠。但是，不幸的是，发现表达高PTPεC的线无法保持。为了鉴定PTPεC的新底物蛋白结合蛋白，使用白血病细胞组成型表达野生型或非活性突变体PTPεC进行了生化纯化，并发现某些酪氨酸磷酸化的蛋白质特异性地与非活性突变形式结合。目前，这些蛋白质正在鉴定。