癌のワールブルグ効果に関連するスプライシング異常の意義と機序

癌症中与瓦尔堡效应相关的剪接异常的意义和机制

基本信息

批准号：
22700893
负责人：
田沼延公
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Miyagi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22700893/
关键词：
スプライシング解糖系がんワールブルグ効果 PKM 代謝

项目摘要

腫瘍細胞における嫌気的解糖系の構成的異常亢進(ワールブルグ効果)と関連する、解糖系酵素ピルビン酸キナーゼM(PKM)遺伝子スプライシング異常の意義と分子機構を明らかにすることを目的として、独自のシステム開発に取り組んだ;「1」“本来PKMのスプライシングが変換する場面(細胞の分化やがん化等)においても、一定のスプライシングアイソフォーム(M1またはM2)が発現され続ける”マウス(M1/M2-ノックイン(KI)マウス)の作製に取り組んだ。M1-KIマウスに関しては、相同組み換えES細胞樹立、キメラマウス作製、ヘテロM1-KIマウス作出までを完了し、さらにホモKIマウスの作製やBL6バックグラウンドへの戻し交配に取り掛かった。M2-KIに関しては、ターゲティングベクター(TV)作製が完了し、ES細胞への導入を行い、現在、相同組み換え体のスクリーニングを行っている。「2」レポーター遺伝子由来の蛍光タンパク(EGFP・DsRed)発現によってPKMスプライシングパターンをモニターできるマウスの作製に取り組んだ。トランスジェニックマウス作製においては、BAC-Tgembed法を採用することとし、レポーター遺伝子の基本カセットのBACクローンへの埋め込みが完了した。これら取組みにより、スプライシング異常・ワールブルグ効果を標的とした新規がん治療・診断・予防開発に向け、次年度以降の研究展開に重要な独自システムの開発が大きく前進した。

纳入目的和分子机制，目的是阐明显着性和分子机制，这与肿瘤细胞中厌氧糖系统的增强有关（walvorg效应）。剪接被转换（细胞分化，癌症等），某些剪接同工型（M1或M2）继续进行”（M1）小鼠（M1） /M2-KNOCK-IN（KI）小鼠）。关于M1-KI鼠标，我们完成了由嵌合鼠制成的局部ES细胞树建立，并创建了Hetero M1-KI小鼠，并开始制作Homo Ki小鼠并繁殖到BL6背景。对于M2-KI，靶向向量（TV）已完成，引入了ES细胞，目前正在筛选本地化。 “ 2”报告者衍生的荧光蛋白（EGFP / dsred）表达式是为了创建可以监视PKM Spracing模式的鼠标。在转基因小鼠的产生中，采用了BAC-TGEMBED方法，并将记者基因的基本盒式嵌入BAC克隆中。这些举措极大地推动了专有系统的发展，这些系统对于下一个财政年度之后对研究开发很重要，对于针对剪接异常和沃尔堡效应的新癌症治疗，诊断和预防开发。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of mouse brain tumor models derived from neural stem cells

开发源自神经干细胞的小鼠脑肿瘤模型

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
0
作者：
西村孝司、脇田大功;他;大西伸幸
通讯作者：
大西伸幸

リン酸化によるスプライシング装置タンパクSap155/Sf3b1制御機構

通过磷酸化调节剪接装置蛋白 Sap155/Sf3b1

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Miyuki Nomura;Kenichi Shiiba;Nobuhiro Tanuma;田沼延公
通讯作者：
田沼延公

総説:PKMスイッチと発がん

评论：PKM 开关和致癌作用

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
実験医学増刊「がんと代謝」
影响因子：
0
作者：
Takahashi D;Azuma H;Sakai H;Sou K;Wakita D;Abe H;Fujihara N;Horinouchi H;Nishimura T;Kobayashi K;Ikeda H.;田沼延公
通讯作者：
田沼延公

Switch of pyruvate kinase M (PKM) isoforms in human breast cancers

人类乳腺癌中丙酮酸激酶 M (PKM) 亚型的转换