樹状細胞及び腫瘍細胞による融合細胞を用いた腫瘍特異的免疫応答の誘導

使用树突状细胞和肿瘤细胞的融合细胞诱导肿瘤特异性免疫反应

基本信息

批准号：
14770924
负责人：
田中康広
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770924/
关键词：
融合細胞アロ反応樹状細胞腫瘍特異的免疫反応 MUC1 MLR 腫瘍特異的免疫応答

项目摘要

現在まで我々は、樹状細胞と腫瘍細胞による融合細胞を用い、腫瘍特異的免疫反応の誘導および免疫寛容の観点より検討を行ってきた。特に、アロ反応を利用した免疫能増強効果に関して研究を行った。昨年までの研究により、DBA/2マウス由来の扁平上皮癌細胞株(KLN205)と同系(DBA/2)及び異系(C57BL/6)マウスの骨髄より採取された樹状細胞から融合細胞の作製に成功し、腫瘍及び樹状細胞由来の細胞表面抗原は融合細胞表面に発現されることを確認した。しかし、KLN205細胞が発現する腫瘍特異的抗原は不明であるため、腫瘍抗原としてMUC1を選択し、KLN205細胞に遺伝子導入した際の、融合細胞を作製させた際の融合細胞におけるMUC1の発現に関して検討した。その結果、KLN205細胞に遺伝子導入されたMUC1は、腫瘍細胞表面での発現を認め、融合細胞表面にも発現されることがフローサイトメトリーで確認された。腫瘍と同系もしくは異系の樹状細胞より作製された融合細胞のアロ反応によるT細胞の免疫誘導能増強効果を調べるために、MLR(Mixed Lymphocyte Reaction)を行い、同系および異系融合細胞の刺激による効果について比較検討した。その結果、同系融合細胞とT細胞の共培養による刺激よりも、異系融合細胞による刺激の方が、明らかにT細胞の増殖を誘導することがわかった。また融合細胞とT細胞を共培養した際の培養液中に含まれるIL-2をはじめとするサイトカインの分泌も、異系融合細胞との共培養の方が、有意に亢進していた。今後は、腫瘍と同系もしくは異系の樹状細胞より作製された融合細胞の持つ腫瘍特異的な細胞障害能を検討し、アロ反応によるT細胞の免疫誘導能がどのように影響するか追求する方針である。

迄今为止，我们已经使用了由树突状细胞和肿瘤细胞组成的融合细胞来研究肿瘤特异性免疫反应和免疫耐受性的诱导。特别是，对使用同种反应提高免疫反应性的影响进行了研究。直到去年，研究一直成功地从小鼠骨髓（DBA/2）和异源型（C57BL/6）的树突状细胞中创建融合细胞，并用鳞状细胞癌细胞系（KLN205）得出了dbA/2小鼠的鳞状细胞癌细胞（KLN205），并证实了该细胞表面抗原的抗原细胞，表达了f tumors和dendendritirIT dendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendendenden dendendend com。但是，由于KLN205细胞表达的肿瘤特异性抗原尚不清楚，因此我们选择MUC1作为肿瘤抗原，并在选择融合细胞时，在选择融合细胞时选择MUC1在融合细胞中选择MUC1作为Tumor抗原并转染了KLN205细胞时，在融合细胞中检查了MUC1的表达。结果，流式细胞仪证实，转染到KLN205细胞的MUC1在肿瘤细胞的表面表达，并且也在融合细胞的表面上表达。为了研究增强T细胞的免疫诱导潜能，这是由于与肿瘤合成性或异构性的树突状细胞产生的融合细胞引起的，对肿瘤进行了MLR（混合淋巴细胞反应），并比较了合成性和异构融合细胞的刺激作用并进行了比较。结果，发现异质融合细胞的刺激显然诱导了T细胞增殖，而不是通过合成融合细胞和T细胞的共培养刺激。此外，当共培养的融合细胞和T细胞共培养时，当与异质融合细胞共培养时，培养基中包含的IL-2在内的细胞因子的分泌显着增加。将来，我们将研究由与肿瘤合成性或异源的树突状细胞产生的融合细胞的肿瘤特异性细胞毒性潜力，并追求T细胞通过异种反应的免疫诱导能力如何影响它们。