Elucidation of the pathophysiology of colitis in CCR-deficient mice and establishment of a functional classification method for intestinal Th17 cells.

阐明CCR缺陷小鼠结肠炎的病理生理学并建立肠道Th17细胞的功能分类方法。

基本信息

批准号：
21K07984
负责人：
小林隆志
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Oita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、ケモカイン受容体に着目して感染防御を担うTh17細胞と免疫寛容を担うTh17細胞を識別する方法を確立することである。昨年度、腸炎の病態形成に働くケモカインとTh17細胞を明らかにするため、マウスにDSSを投与して実験的大腸炎を誘導した。その結果、野生型マウスやCCR2欠損マウスに比べCCR6欠損マウスで重症化した腸炎が、CCR2/6二重欠損マウスでは有意に軽症化することを見出した。本年度、この原因を解明するためさらなる解析を進めた。まず、CCR6単独の欠損で重症化した実験的腸炎が、CCR2阻害剤を投与することで軽症化することを見出した。つまり、CCR2/6のシグナルが薬理学的に遮断されても腸炎が軽症化することが示された。一方、野生型マウスに腸炎を誘導すると、大腸粘膜固有層においてケモカインCCL7, CCL8, およびCCL20の発現が上昇し、CCR2シングル陽性Th17（CCR2+Th17）細胞、CCR6シングル陽性Th17（CCR6+Th17）細胞、およびCCR2/6ダブル陽性Th17（CCR2+/6+Th17）細胞が集積することを見出した。フローサイトメトリー解析によりCCR2+/6+Th17細胞は他のTh17サブセットに比べGM-CSFの産生能が高いことがわかった。興味深いことに、CCR2/6二重欠損マウスの大腸ではGM-CSFの発現レベルが有意に低下していた。従って、CCR2+/6+Th17細胞が腸炎増悪に寄与する炎症性Th17細胞であることが示唆された。この研究成果は学術論文として国際誌に公表した。CCR6+Th17細胞が免疫寛容を担い、CCR2+/6+Th17細胞が炎症を惹起するという仮説を立てて、各Th17サブセットをセルソーターで分離し、遺伝子発現パターンを解析したり、細胞を腸炎モデルマウスに移入して病態変化を観察したりする予定である。

本研究的目的是通过关注趋化因子受体，建立一种区分在感染防御中发挥作用的Th17细胞和在免疫耐受中发挥作用的Th17细胞的方法。去年，为了阐明在结肠炎发病机制中发挥作用的趋化因子和Th17细胞，我们给小鼠施用DSS诱导实验性结肠炎。结果，他们发现小肠结肠炎在 CCR6 缺陷小鼠中比野生型或 CCR2 缺陷小鼠更严重，但在 CCR2/6 双缺陷小鼠中明显不那么严重。今年，进行了进一步分析以阐明原因。首先，我们发现仅因 CCR6 缺乏而加剧的实验性肠炎可通过给予 CCR2 抑制剂得到缓解。换句话说，表明即使通过药物阻断CCR2/6信号，肠炎也会变得更轻。另一方面，当野生型小鼠诱发肠炎时，大肠固有层趋化因子CCL7、CCL8和CCL20的表达增加，导致CCR2单阳性Th17（CCR2+Th17）细胞和CCR6发现单阳性 Th17 (CCR6+Th17) 细胞和 CCR2/6 双阳性 Th17 (CCR2+/6+Th17) 细胞积聚。流式细胞术分析显示，CCR2+/6+ Th17 细胞比其他 Th17 亚群具有更高的产生 GM-CSF 的能力。有趣的是，CCR2/6双缺陷小鼠结肠中的GM-CSF表达水平显着降低。因此，提示CCR2+/6+ Th17细胞是导致肠炎恶化的炎症性Th17细胞。这项研究的结果作为学术论文发表在国际期刊上。基于CCR6+Th17细胞负责免疫耐受和CCR2+/6+Th17细胞诱导炎症的假设，我们使用细胞分选仪分离每个Th17亚群，分析基因表达模式，并将细胞用于肠炎模型小鼠中。就是介绍动物并观察其病理情况的变化。

项目成果

期刊论文数量（36）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

樹状細胞におけるTRAF6シグナルがCitrobacter rodentium感染性腸炎に与える役割.

TRAF6 信号在树突状细胞中在柠檬酸杆菌感染的肠炎中的作用。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
望月晶子; Thanyakorn chalalai1; 伊藤加奈子; 有木晋平; 小坂聡太郎; 佐知望美; 神山長慶; 小林隆志.
通讯作者：
小林隆志.

小坂聡太郎, 皆田美月, 有木晋平, 水上一弘, 神山長慶, 小林隆志, 村上和成.

小坂宗太郎、皆田瑞希、有木新平、水上一宏、神山永吉、小林隆、村上一成。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
マウス腸炎モデルを用いた大建中湯のSLPI発現を介した腸管保護作用の解析
通讯作者：
マウス腸炎モデルを用いた大建中湯のSLPI発現を介した腸管保護作用の解析

Verification of T cell inhibitory effect of lipid mediator Oleylethanolamide

脂质介质油乙醇酰胺的T细胞抑制作用验证

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasuhiro Soga; Naganori Kamiyama; Takashi Ozaki; Benjawan Saechue; Astri Dewayani; Nozomi Sachi; Sotaro Ozaka; Shinpei Ariki; Thanyakorn Chalalai; Chiaki Fukuda; Takashi Kobayash
通讯作者：
Takashi Kobayash

臨床報告遺伝子解析を行った結膜寄生の東洋眼虫症の2例

临床报告：结膜寄生性东方眼虫病两例基因分析。