実験動物がんのがん遺伝子

实验动物癌症中的癌基因

• 批准号: 02151079
• 负责人: 長尾 美奈子
• 金额: $ 9.92万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02151079/
• 关键词: 食品中発がん物質ヘテロサイクリックアミン; MeIQによる扁平上皮がん; Haーras活性化G→T変異; プロテインホスファタ-ゼとがん化; 放射線間接照射とがん遺伝子; in vitro自然悪性化

食品中に存在するヘテロサイクリックアミン、IQ、MeIQ、MeIQxで誘発されたラット外耳道ジンバル腺の扁平上皮がんにおけるHaー<ras>___ーの活性化をPCR法及び選択的ハイブリダイゼ-ション法を用いて調べた。何れの化合物で誘発された腫瘍でも、cーHaー<ras>___ーの13番目のコドンの第2字目のG→Tの変化が見られた。MeIQでは特異的にこの変化が起こりやすいことがわかった。更に興味あることに、MeIQ誘発マウス前胃扁平上皮がん7例について、single strand conformational polymorphism(SSCP)及びdirect sequencingを用いてHaー<ras>___ーを解析した結果、変異のあった全てで、コドン13の第2字目がG→Tに変異していることを見出した。以上ラットジンバル腺及びマウス前胃扁平上皮がんでは、60〜70%のがんで<ras>___ーが活性化しており、そのほとんどはHaー<ras>___ーコドン13、第2字目のG→Tが起こるという、即ち動物種及び臓器に無関係に、同一変異が誘発されるという特徴を見出すことができた。MeIQ及びIQで誘発されたラット肝がんでは、セリン・スレオニンホスファタ-ゼ2Aの触媒サブユニットの発現が著しく上昇していることを見出した。このホスファタ-ゼに対する特異的阻害剤であるオカダ酸で、がん遺伝子導入によりトランスホ-ムした細胞を処理すると、正常細胞の形態に戻った。同ホスファタ-ゼは細胞の悪性化に関与していることが示された。放射線照射により誘発された胸腺腫では、Kiー<ras>___ーが活性化している。一方、胸腺摘出後、マウスに放射線を照射し胸腺を戻して誘発された間接胸腺腫では、Kiー<ras>___ーは活性化していないが、それらのDNAはチャイニ-ズハムスタ-細胞をトランスホ-ムする活性を示した。現在このがん遺伝子をクロ-ニングしている。チャイニ-ズハムスタ-胎児(CHE)細胞の培養に伴う自然がん化は多段階で、3qのトリソミ-にNー<ras>___ーの変異が加わると悪性細胞になることを明らかにした。

使用 PCR 和选择性杂交方法对食品中杂环胺、IQ、MeIQ 和 MeIQx 诱导的大鼠外耳道万向腺鳞状细胞癌中 Ha<ras>___ 的激活进行了研究在两种化合物诱导的肿瘤中，观察到 c-Ha<ras>___- 第 13 个密码子的第二个字母发生 G→T 变化。结果发现，这种变化特别容易发生在MeIQ中。更有趣的是，通过使用单链构象多态性（SSCP）和直接测序分析七种 MeIQ 诱导的小鼠前胃鳞状细胞癌中的 Ha<ras>___，他们发现了所有密码子的第二个字母的突变。 13从G突变为T。如上所述，<ras>___在60-70%的大鼠万向腺和小鼠前胃鳞状细胞癌中被激活，其中大多数是Ha<ras>___-密码子13，第二个字符。 G→T发生，即无论动物种类和器官如何，都会引起相同的突变。我们发现MeIQ和IQ诱导的大鼠肝癌中丝氨酸苏氨酸磷酸酶2A催化亚基的表达显着增加。当通过癌基因导入转化的细胞用冈田酸（该磷酸酶的特异性抑制剂）处理时，它们恢复到正常的细胞形态。相同的磷酸酶被证明参与细胞的恶性转化。 Ki<ras>___ 在辐射诱发的胸腺瘤中被激活。另一方面，在通过照射小鼠并在胸腺切除后返回胸腺诱导的间接胸腺瘤中，Ki<ras>___没有被激活，但其DNA转染中国仓鼠细胞 - 显示出刺激活性。我们目前正在克隆这种癌症基因。研究表明，培养的中国仓鼠胚胎 (CHE) 细胞的自发癌症发展发生在多个阶段，并且当 N-<ras>___- 突变添加到三体性 3q 时，细胞就会变成恶性。