遺伝子導入免疫担当細胞を用いた新たな腫瘍免疫遺伝子治療の開発

利用基因转移免疫活性细胞开发新型肿瘤免疫基因疗法

基本信息

批准号：
02J61449
负责人：
金子新
金额：
$ 1.54万
依托单位：
University of Tsukuba (2003)Ehime University (2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

白血病におけるWT-1のように、近年いくつかの造血器腫瘍において免疫療法の標的として有望な腫瘍関連抗原が同定されつつある。今回われわれは未だ特異的な腫瘍抗原が同定されていない悪性リンパ腫に着目し、リンパ腫細胞に特異的な細胞障害性T細胞を樹立する研究を行なった。リンパ腫細胞における免疫グロブリンの相補結合領域(CDR)配列は個々の腫瘍における特異性が高く、リンパ腫細胞のみが持つ腫瘍特異抗原と考えられる。我々は数例の悪性リンパ腫症例より腫瘍組織を採取しCDRを含む配列を増幅レトロウイルスベクターへの組み込みの後に患者由来CD34陽性細胞へ遺伝子導入を行なった。種々の条件設定を行ないつつ、腫瘍特異抗原を発現する樹状細胞を誘導している。今後、患者T細胞との培養によって腫瘍特異CTLを樹立する計画である。一方で臨床応用を念頭において、抗腫瘍効果の中心を担うT細胞の大量培養系の確立も行なった(Kaneko et al.,11^<th> annual congress of European Society of Gene Therapy, Edinburgh, UK, 2003)。大量培養の過程においてT細胞の有する細胞障害性が低下することが確認されたため、それを補うべく細胞障害性分子(TRAIL, perforin)を強制発現する患者T細胞を作成した。これらの細胞がHLA拘束に細胞障害性を増強させるか、また先ほどのCDR発現患者樹状細胞で刺激することによって、患者リンパ腫細胞の制御効果を持つかどうかをin vitroならびにin vivoで検討中である。

近年来，与肿瘤相关的抗原（例如白血病中的WT-1）已被确定为几种造血肿瘤中免疫疗法的潜在靶标。在本文中，我们专注于尚未用特定肿瘤抗原鉴定的恶性淋巴瘤，并进行了一项研究以建立特异性的淋巴瘤细胞的细胞毒性T细胞。淋巴瘤细胞中免疫球蛋白的互补结合区域（CDR）序列在个体肿瘤中高度特异，被认为是仅由淋巴瘤细胞含有的肿瘤特异性抗原。我们从几种恶性淋巴瘤中收集了肿瘤组织，扩增了含CDR的序列，并将其掺入逆转录病毒载体中，然后转导到患者来源的CD34阳性细胞中。在设定各种条件时，诱导表达肿瘤特异性抗原的树突状细胞。将来，我们计划通过用患者T细胞培养肿瘤特异性CTL。另一方面，考虑到临床应用，也已经建立了一个大规模的T细胞培养系统，在抗肿瘤效应中起主要作用（Kaneko等，11^<TH>欧洲基因治疗学会年度大会，英国爱丁堡，英国，2003年）。据证实，在大规模培养过程中，T细胞的细胞毒性降低了，因此创建了强行表达细胞毒性分子（Trail，Perforin）的患者T细胞以补偿这一点。这些细胞是否增强HLA限制中的细胞毒性，以及使用先前提到的表达CDR的患者树突状细胞刺激是否正在体外和体内研究。