魚類の始原生殖細胞(PGCs)の起源及び分化に関する研究

鱼类原始生殖细胞（PGC）的起源和分化研究

基本信息

批准号：
02J00439
负责人：
山崎輝美 (長井輝美)
金额：
$ 1.6万
依托单位：
University of Toyama (2003)Hokkaido University (2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J00439/
关键词：
始原生殖細胞 PGCs 胞盤移植生殖系列キメラゼブラフィッシュ生殖質

项目摘要

(1)ゼブラフィッシュを用い、胚盤移植を試み、同法の発生への影響および生殖系列キメラの作出への有効性を検討した。胞胚期の胚盤全体、胚盤上部、または胚盤下部を他胚の動物極へ移植した。全ての移植群で、正常な頭部・背方構造を持つ個体が得られたが、胚盤下部を移植した胚では頭部構造を欠く個体の出現頻度が高かった。胚盤全体または胚盤下部を移植した胚から発生した多くの個体(10/11)の生殖隆起にドナー胚盤に由来するPGCsが認められ、本種での生殖系列キメラ個体の作出に、胚盤移植法が有効であることが明らかとなった。(2)胚盤全体の移植胚から得られた個体において、咽頭部もしくは耳胞付近での異所的なPGCsの存在が明らかになった。これらには、ドナーだけではなくレシピエント由来のPGCsも含まれていた。また、これらの咽頭部もしくは耳胞付近に分布するPGCsは、発生過程で、分布を変化させなかった。このPGCsの誤移動は、重複処理、あるいは胚細胞の混合が原因であると考えられた。また、異所に残存する中胚葉細胞塊が移動に影響を与える可能性も示唆された。(3)咽頭部もしくは耳胞付近の異所的なPGCSを12体節期(受精後15時間)より経時的に観察したところ、正常の位置に分布するPGCsと同様の組織学的変化を呈した。これらの異所的PGCsは、PGCsが生殖隆起に到達後に示す生殖幹細胞への組織学的な変化および分裂を、生殖隆起に位置するPGCsと同調的に行った。これらの結果は、PGCsが位置情報なしに自律的に分化を遂げるか、異所的なPGCsが確認された咽頭部や耳胞付近の中胚葉細胞がPGCsの分化にとって好的環境であったかのどちらかを示すと考えられた。

（1）我们使用斑马鱼尝试了胚泡植入，并检查了该方法对生产种系嵌合体的发育及其有效性的影响。将整个胚胎胚泡，上胚泡或下胚泡植入其他胚胎的动物极。在所有植入组中，都获得了正常头部和背侧结构的个体，但是植入下胚甲的胚胎显示出很高的缺乏头部结构的个体。在许多个体（10/11）的细菌脊中观察到源自源胚胚层的PGC（10/11），这些胚胎是由已植入整个胚胚层或下胚胚层植入的胚胎产生的，并且已经揭示了胚泡转移有效地在该物种中生成种系奇数个体。（2）在整个囊胚层中从植入的胚胎获得的个体中揭示了咽部或耳托附近的异位PGC。其中包括来自接收者和捐助者的PGC。此外，这些PGC分布在咽部或耳托附近，在发育过程中没有改变其分布。 PGC的这种失误被认为是由于重叠的治疗或生殖细胞混合。还建议在异位中剩余的中胚层细胞肿块可能会影响迁移。（3）当咽部中的异位PGC从12个心情阶段（施肥后15小时）观察到随着时间的流逝，患者的组织学变化与在正常位置分布的PGC相似的组织学变化。这些异位PGC进行了组织学变化，并分裂为PGCS在与菌群中的PGC中到达细菌山脊后所表现出的生殖干细胞。这些结果表明，PGC可以在没有位置信息的情况下自主区分自主，或者鉴定出异位PGC的咽部和耳胶附近的中胚层细胞有利于分化PGC。