突然変異マウスを用いたmi転写因子のマスト細胞における転写調節機構の解析

利用突变小鼠分析肥大细胞mi转录因子的转录调控机制

基本信息

批准号：
13770107
负责人：
森井英一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770107/
关键词：
マスト細胞 MITF SCF KIT 突然変異マウス分化表現型

项目摘要

mi遺伝子座がコードする転写因子MITFはマスト細胞分化に重要であることを我々はこれまで報告した。MITFに異常をきたしたmi/miマウスでは皮膚マスト細胞の数が3分の1に減少する。この原因としてマスト細胞の最も重要な増殖因子であるstem cell factor(SCF)のレセプターであるKITの発現がmi/miマウスの皮膚マスト細胞で低下することがあげられる。これまで用いたmi/miマウスは、C57BL/6系統であった(B6-mi/mi)が、今回、我々は戻し交配を行い、WBを遺伝学的背景とするmi/miマウスを作成した(WB-mi/mi)。このWB-mi/miマウスではB6-mi/miマウスと異なり、皮膚マスト細胞数の減少がみられなかった。しかし、B6-mi/miマウス由来マスト細胞と同様、WB-mi/miマウス由来マスト細胞でもKITの発現が低下していた。このことは、KITの発現低下にも関わらず、皮膚マスト細胞の数を維持する何らかの因子がWB-mi/miマウスでは存在することを示す。そこでマッピングを行ったところ、ゲノム上のSCFをコードする領域近傍にこの因子が存在することがわかった。SCF蛋白の配列をB6系統とWB系統のマウスで比較したが有意な差はなかった。SCFには膜結合型と可溶型の2種類の蛋白があるが、後者の方が皮膚マスト細胞数に重要であることが報告されている。SCFmRNAにはalternative spliceによりlong form(SCF-L)とshort form (SCF-S)の2種類がある。可溶型SCFはSCF-LmRNAからの方が産生されやすい。そこで、B6系統とWB系統のマウスの皮膚におけるSCF-LとSCF-Sの量比を検討したところ、WB系統でSCF-L/SCF-S比が有意に高かった。以上のことより、WB系統のマウスではマスト細胞の数を増加させるSCFの量がB6系統のマウスよりも多く、そのためにKITの発現量の低下にもかかわらずマスト細胞の減少が認められなかったことが示唆された。

我们之前报道过mi位点编码的转录因子MITF对于肥大细胞分化很重要。在 MITF 异常的 mi/mi 小鼠中，皮肤肥大细胞的数量减少了三分之一。其原因是 mi/mi 小鼠皮肤肥大细胞中干细胞因子 (SCF) 的受体 KIT 的表达降低，而干细胞因子是肥大细胞最重要的生长因子。到目前为止使用的 mi/mi 小鼠是 C57BL/6 品系 (B6-mi/mi)，但这次我们进行回交以创建具有 WB 遗传背景的 mi/mi 小鼠 (WB-mi/mi)。与 B6-mi/mi 小鼠不同，在这些 WB-mi/mi 小鼠中没有观察到皮肤肥大细胞数量减少。然而，与源自B6-mi/mi小鼠的肥大细胞相似，源自WB-mi/mi小鼠的肥大细胞中KIT的表达降低。这表明 WB-mi/mi 小鼠中存在一些因素，尽管 KIT 表达减少，但仍维持皮肤肥大细胞的数量。当他们进行绘图时，他们发现这个因子存在于基因组上编码 SCF 的区域附近。比较B6品系和WB品系小鼠的SCF蛋白序列，未发现显着性差异。 SCF蛋白有两种类型，膜结合型和可溶型，有报道后者对于皮肤肥大细胞的数量更为重要。 SCFmRNA 有两种类型，长型 (SCF-L) 和短型 (SCF-S)，具体取决于可变剪接。可溶性 SCF 更容易由 SCF-LmRNA 产生。因此，当我们检查B6和WB品系小鼠皮肤中SCF-L与SCF-S的比率时，我们发现WB品系小鼠的SCF-L/SCF-S比率明显较高。由上可知，与B6品系小鼠相比，WB品系小鼠中增加肥大细胞数的SCF量较高，因此，尽管KIT表达减少，但未观察到肥大细胞减少。。