ラフト形成におけるSNARE系の機能と作用機構の解明

阐明 SNARE 系统在筏形成中的功能和作用机制

基本信息

批准号：
13216095
负责人：
白瀧博通
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216095/
关键词：
ラフト細胞内小胞輸送 SNARE系シンタキシン細胞骨格フォドリン

项目摘要

最近、細胞のがん化、がん細胞の浸潤・転移に深く関与しているreceptor for advanced glycation end products(RAGE)が、ラフトと呼ばれるコレステロールに富んだ微小膜領域に局在化することが明らかになっている。さらに、ラフト形成には、細胞内小胞輸送が関与していることが明らかになっている。これらのことから、ラフト形成における細胞内小胞輸送の機能と作用機構を解明することは、生物学のみならず医学においても重要な課題となっている。そこで、本研究では、ラフト形成に関与している可能性が高いSNARE系構成因子であるシンタキシン-3に結合する新たな蛋白分子の同定を試み、p80とp270の二つの新たなシンタキシン-3結合蛋白質を同定することに成功した。このうち、p80は、新規のシンタキシン-3結合蛋白質であった。一方、p270は、細胞膜直下の主要細胞骨格構成因子であるα-フォドリンであった。α-フォドリンは、シンタキシン結合蛋白質であるMunc18やSNAP-25と競合的にシンタキシンに結合し、SNARE複合体形成を制御している可能性が示唆された。さらに、シンタキシンは、細胞膜直下でF-アクチンとメッシュワークを形成しているα-フォドリンとのみ結合する可能性が出てきた。α-フォドリンは、細胞運動において細胞骨格の再編成に関与しているが、本研究から、α-フォドリンが、細胞運動においてSNARE系を介して細胞内小胞輸送にも関与している可能性が出てきた。このように、本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ達成することができた。

最近，研究发现，与细胞癌变和癌细胞侵袭和转移密切相关的晚期糖基化终末产物（RAGE）受体位于富含胆固醇的微膜区域，称为筏。此外，已经揭示细胞内囊泡运输参与筏形成。由于这些原因，阐明筏形成中细胞内囊泡运输的功能和机制已成为生物学和医学领域的一个重要问题。因此，在这项研究中，我们试图鉴定与syntaxin-3（可能参与筏形成的SNARE系统的一个组成部分）结合的新蛋白质分子。其中，p80 是一种新型的 Syntaxin-3 结合蛋白。另一方面，p270 是 α-fodrin，它是位于细胞膜正下方的主要细胞骨架成分。有人提出，α-胞质蛋白与突触融合蛋白结合，与突触融合蛋白结合蛋白 Munc18 和 SNAP-25 竞争性结合，并可能调节 SNARE 复合物的形成。此外，突触融合蛋白可能仅与 α-胞质蛋白结合，后者与细胞膜下方的 F-肌动蛋白形成网状结构。 α-fodrin参与细胞运动过程中的细胞骨架重组，本研究提示α-fodrin也可能参与细胞运动过程中通过SNARE系统的细胞内囊泡运输。就这样，这项研究的进展超出了预期，能够实现大部分最初的目标。