記憶形成におけるRab3A系とDoc2系の機能と作用機構

Rab3A系统和Doc2系统在记忆形成中的功能和作用机制

• 批准号: 10155214
• 负责人: 白瀧 博通
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10155214/
• 关键词: 記憶; 神経伝達物質; 放出反応; Rab3A; Doc2; Rab3 GAP; dynein

私共の研究室では、低分子量G蛋白質Rab3AとC2様領域を2個有する蛋白質であるDoc2を発見し、Rab3AとDoc2が神経伝達物質の放出に関与していることを明らかにしている。さらに、Rab3Aの活性制御蛋白質としてRabGDI、Rab3GEP、Rab3GAPを、標的蛋白質としてRabphilin3を発見している。Rab3AとDoc2は、おのおののノックアウトマウスを用いた研究から、共に記憶形成に関与している可能性が高くなっている。そこで、私共は、神経伝達物質の放出におけるRab3A系とDoc2系の活性制御機構および作用機構について研究を行い、以下の成果を得た。Rab3GEPとRab3GAPは、共にラット海馬初代培養神経細胞のシナプス終末の細胞質に存在していた。このうち、Rab3GEPは、ラット褐色細胞腫細胞からのCa^<2+>依存性のgrowth hormnoneの分泌を抑制した。また、私共は、Rab3GAPのcatalytic subunitであるp130に結合する蛋白質としてp150をクローニングして一次構造を決定し、Rab3GAPがnoncatalytic subunitであるp150とcatalytic subunitであるp130の1:1のheterodimerであることを明らかにした。一方、私共は、Doc2がホルボールエステル依存性にMunc13と結合し、Ca^<2+>依存性の分泌反応を制御していることを明らかにしている。本研究で、私共は、Doc2が、微小管モーターであるダイニンのlight chainであるtctex-1に結合することを明らかにした。tctex-1結合部位を含むDoc2のN末端側フラグメントは、trans-Golgi networkから後期エンドゾームへの微小管を介した小胞輸送を抑制した。このことから、Doc2はダイニンによる小胞輸送をも介して、神経伝達物質の放出に関与している可能性が高くなった。このように、本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ完全に達成することができた。

我们的实验室发现了DOC2，这是一种具有两个低分子量G蛋白Rab3a和两个C2区域的蛋白质，并指出Rab3a和Doc2参与了神经递质的释放。此外，发现Rabgdi，Rab3GEP和Rab3GAP是目标蛋白作为靶蛋白作为靶蛋白的目标蛋白。 RAB3A和DOC2更有可能使用淘汰鼠标从研究中参与记忆形成。因此，我们研究了RAB3A系统的活性控制机理和动作机理和DOC2系统在释放神经递质时，并获得了以下结果。 Rab3gep和Rab3gap都存在于第一大鼠海马神经细胞的罪行中。其中，RAB3GEP抑制了大鼠棕色细胞的Ca^<2+>依赖性分泌。此外，我们将P150作为一种与p130结合的蛋白质，该蛋白是Rab3gap的催化亚基，并确定了杂化二聚体。另一方面，我们揭示了DOC2与Hol Ball Esther结合，控制了Ca^<2+>依赖分泌反应。在这项研究中，我们澄清了DOC2与TCTEX-1结合，TCTEX-1是一种小管电动机，即Dainin的轻链。包括TCTEX-1结合位点在内的DOC2的N末端片段抑制了从反式高尔基网络到后端Zome的微瘤管的发声传输。由此，DOC2更有可能通过Dainin Veline Transpertation参与神经递质的释放。这样，这项研究的进展超出了预期，并且几乎完全实现了最初的目的。