増殖因子制御による血管発生の時間的・空間的解析

通过生长因子控制进行血管发育的时空分析

• 批准号: 12877277
• 负责人: 芫木 均
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877277/
• 关键词: 網膜血管新生; 周皮細胞; 内皮細胞; PDGF受容体; vascular-remodeling; Ang1; PDGFR-α抗体; PDGFR-β抗体; 血管発生; 血小板由来増殖因子; 血管内皮細胞; 血管壁細胞; 血管リモデリング

本研究では、病的網膜血管新生理解への足がかりとするため正常網膜血管発生機構を詳細に把握することを目的とした。網膜血管形成における周皮細胞-内皮細胞のinteractionの役割を検討するため、血小板由来増殖因子(PDGF)受容体βにたいするモノクローナル抗体を新生児マウス腹腔に注入し、フラットマウント法にて網膜血管形成を観察した。抗PDGFR-β抗体を投与したマウスでは網膜血管は壁細胞による被覆を失い、顕著に拡張・蛇行しvascular remodelingにも異常をきたした。電顕像にても内皮細胞間結合の解離、細胞外マトリックス異常が見られた。網膜浮腫が起こった後10日目には網膜出血、硝子体出血がみられた。このような状態はpericyte loss後に進展する糖尿病網膜症に類似していた。抗PDGFR-α抗体では、グリア細胞抑制により網膜血管が伸長しないが、こうした周皮細胞の異常はみられなかった。周皮細胞は様々な因子を分泌し内皮細胞を制御している。アンジオポエチン1(Ang1)はそのような因子のひとつであるが、その単独投与により周皮細胞の被覆がない状態の血管においても網膜血管の正常な形成がみられた。以上の結果よりPDGFR-βによる制御が周皮細胞の制御因子になっていること、Ang1による制御が周皮から内皮への主要制御機構になっていることが示唆された。糖尿病網膜症などにおけるpericytelossの意義が明らかになったばかりでなく、今後の血管再生的治療法の開発にAng1が有用であることが示された。

本研究的目的是详细了解正常视网膜血管发育的机制，为理解病理性视网膜新生血管奠定基础。为了研究周细胞-内皮细胞相互作用在视网膜血管生成中的作用，将抗血小板源性生长因子（PDGF）受体β的单克隆抗体注射到新生小鼠的腹膜腔中，并使用平板安装法观察视网膜血管生成。 。在用抗PDGFR-β抗体治疗的小鼠中，视网膜血管失去了壁细胞的覆盖，变得明显扩张和扭曲，并且血管重塑出现异常。电子显微镜图像还显示内皮细胞连接的解离和细胞外基质的异常。视网膜水肿发生10天后，观察到视网膜出血和玻璃体出血。这种情况类似于周细胞丢失后发生的糖尿病视网膜病变。使用抗PDGFR-α抗体，由于神经胶质细胞抑制，视网膜血管没有伸长，但没有观察到这种周细胞异常。周细胞分泌多种因子并控制内皮细胞。血管生成素 1 (Ang1) 就是这样的因子之一，当单独施用时，即使在没有周细胞覆盖的血管中也可以观察到视网膜血管的正常形成。上述结果提示PDGFR-β的调节是周细胞的调节因子，Ang1的调节是从周细胞到内皮的主要控制机制。这不仅揭示了周细胞丢失在糖尿病视网膜病变中的重要性，而且表明Ang1对于未来血管再生治疗的发展是有用的。

项目成果

Otani A, Takagi H, Oh H, Koyama S, Honda Y: "Angiotensin-II induces expression of the Tie2 receptor ligand, angiopoietin-2, in bovine retinal endothelial cells"Dinbetes. 50. 867-875 (2001)

Otani A、Takagi H、Oh H、Koyama S、Honda Y：“血管紧张素-II 诱导牛视网膜内皮细胞中 Tie2 受体配体血管生成素-2 的表达”Dinbetes。

Otani A, Takagi H, Oh H, Koyama S, Ogura Y, Matsumura M, Honda Y: "Vascular Endothelial Growth Factor Family and Receptor Expression in Human Choroidal Neovascular Membranes"Microvascular Res.. (in press).

Otani A、Takagi H、Oh H、Koyama S、Ogura Y、Matsumura M、Honda Y：“血管内皮生长因子家族和人脉络膜新生血管膜中的受体表达”微血管研究（出版中）。

Takagi H, Suzuma K, Otani A, Oh H, Koyama S, Ohashi H, Honda Y: "Role of Vitronectin Receptor-Type Integrins and Osteopontin in lschemia-Induced Retinal Neovascularization"Jpn J Ophthalmol. (in press).

Takagi H、Suzuma K、Otani A、Oh H、Koyama S、Ohashi H、Honda Y：“玻连蛋白受体型整合素和骨桥蛋白在缺血引起的视网膜新生血管中的作用”Jpn J Ophamol。