胃機能発現の分子メカニズムの解析

胃功能表达的分子机制分析

基本信息

批准号：
12877035
负责人：
古関明彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

FKH6欠損マウスにおけるパイエル板低形成の細胞レベルでの機序を明らかにした。FKH6遺伝子は、腸管の間充織においてのみ発現している。FKH6欠損マウス胎児では、まづ、IL7Raを発現するパイエル板のオーガナイザーとして機能する細胞の腸管間充織へのホーミングまたはそこでの凝集が障害されていることが示された。その結果、腸管間充織由来のVCAMを発現する細胞の凝集が有意に遅延することが示された。おもしろいことに、胎生17、5日までにVCAM陽性細胞の凝集がおこったパイエル板原基では、それにひき続いておこるCD11陽性細胞のホーミングもおこりパイエル板へと発達していくが、遅れてVCAM陽性細胞の凝集がおこったパイエル板原基ではパイエル板は形成されないことが示された。これらの結果は、FKH6は、腸管間充織細胞の正常な機能発現に寄与していることを示している。転写制御因子であるFKH6がどのような遺伝子の発現に寄与しうるかを、今までにパイエル板形成に寄与することが示されてきた遺伝子に焦点をあてて解析した。その結果、多くのTNFファミリーにそれらのレセプター、また、ケモカインの発現に顕著な変化は観察されなかったが、唯一LTbレセプターの発現だけが顕著に低下していた。LTbレセプターは、腸管間充織において発現していることからFKH6タンパクの標的遺伝子座のひとつである可能性が示された。また、FKH6欠損マウスでは加齢にしたがい、下部消化管にパイエル板様のリンパろ胞の過形成が観察された。骨髄キメラを用いた解析は、この過形成も腸管間充織の異常に基づくことを示した。すなわち、FKH6は本来下部消化管に存在するColorectal patchの腸管間充織を正常なサイズにするためにも重要な役割を果たすことを示した。今後、FKH6欠損マウス胎児腸管における遺伝子発現の変化を系統的に解析するための基盤として、マウス胎児腸管の全長cDNAライブラリを、作製し、15Kの独立したクラスターを同定した。

揭示了FKH6缺陷小鼠中吡咯板低形式的机理。 FKH6基因仅在肠道内部表达。 FKH6缺乏的小鼠胎儿表明，将细胞归为肠道遗嘱或聚集，在细胞中作为表达IL7RA的Pyel板的组织者的功能受损。结果，结果表明，表达源自肠道电车的VCAM的细胞的聚集被显着延迟。有趣的是，在Pyell Itabara中，VCAM阳性细胞在第5和第5位内凝聚，CD11阳性细胞的归巢也将发展为Pyeal板，但VCAM延迟了。不是由Pyiel Itabara形成的，该pyabara是由阳性细胞聚集引起的。这些结果表明FKH6有助于肠道成熟细胞的正常功能。我们分析了哪种基因表达（一种转移控制因子）可以有助于基因的表达，重点是已证明有助于pyeal板形成的基因。结果，许多TNF家族没有观察到其受体和趋化因子表达的显着变化，但是只有LTB受体的表达显着降低。 LTB受体在Iliac Memorial中表达并编织，表明它可能是FKH6蛋白的靶向属之一。另外，在下部消化道中观察到了FKH6缺乏的小鼠，并且在下层消化道中观察到类似淋巴样淋巴细胞。使用骨髓嵌合体的分析表明，这种形状也基于肠道疯子的异常。换句话说，FKH6表明它在使结直肠贴片的最初有机尺寸的结直肠贴片中起着重要作用，该贴片最初存在于较低的消化道中，以达到正常的大小。将来，创建了小鼠胎儿肠道的完整长度cDNA文库，作为系统地分析FKH6缺乏小鼠胎儿肠道中基因表达的变化的基础，并确定了15K独立的簇。