虚血性神経細胞死におけるGluR_2仮説の検証

缺血性神经细胞死亡中 GluR_2 假说的验证

基本信息

批准号：
11671356
负责人：
川合謙介
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

最近、虚血後にAMPA型受容体のサブユニット構成が変化することによりAMPA型受容体がカルシウム透過性を持つようになり,遅発性神経細胞死を引き起こす可能性が示唆されたが(GluR2仮説),in vivoでの直接的証拠はいまだ無い.本研究は,GluR2仮説をin vivoで直接的に検証することを目的とする.すなわち,カルシウム非透過性を決定するサブユニットGluR2を持たないAMPA型受容体を選択的に阻害する薬剤を脳虚血動物モデルに投与することにより,海馬CA1細胞の虚血性神経細胞死を抑制することが可能かどうかを検討した.虚血モデルには砂ネズミの両側総頚動脈5分間閉塞モデルを用い,カルシウム透過型AMPA型グルタミン酸受容体の選択的阻害薬である1-naphythyl-acetyl spermin(Nasp)を人工髄液に溶解し様々な濃度および時間で左側脳室内投与した.動物は虚血後7日で潅流固定しCA1の残存細胞数を計測した.mini-osmotic pumpを用い,8ul/hで虚血後2〜7時間から24時間連続投与した場合,わずかな保護効果が認められたが,その効果は僅少であった。lul/hで虚血前日から7日間連続投与した場合(1,5,10,50mM),25mMを2.5ul/10minで1回投与した場合(虚血後1時間,24時間)には有意の保護効果は認められなかった.砂ネズミ一過性前脳虚血による海馬CA1遅発性神経細胞死ではGluR2仮説で提唱された虚血後のAMPA型受容体を介したカルシウム流入は,その細胞死進行の機構において大きな役割を担っているとは考えにくいことが示唆された.平成12年度には,視床網様核ニューロンなど海馬CA1ニューロン以外の神経細胞における虚血性神経細胞死でのGluR2仮説の検証を行う予定である.

最近，有人提出，由于缺血后AMPA型受体的亚基构型的变化，AMPA型受体可能会引起钙渗透，这可能会导致神经细胞死亡延迟（GL2假设）。本研究的直接证据是直接用体内验证GL2假设。河马CA1细胞通过使用宫颈动脉抑制脑缺血性动物模型的药物，两侧使用颈动脉5分钟。类型的谷氨酸受体在人工溶液中溶解在各种浓度和室内的时间保护效果已确认，效果很小。如果您从缺血性前一天（1,5,10,50mm）从缺血前一天开始使用7天（1,5,10,50mm），如果您在2.5ul/10min（缺血1小时）中进行25毫米的25 mm（缺血），则为没有观察到的保护效果。有人认为，在FY28中，不太可能在致命进步的机制中起主要作用。我们计划验证。