Establishment of in utero cell iransplantation and fetal gene therapy model using non-human primate

非人灵长类子宫内细胞移植及胎儿基因治疗模型的建立

基本信息

批准号：
11357009
负责人：
NAKAUCHI Hiromitsu
金额：
$ 23.44万
依托单位：
Univ. of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

We initially developed an in utero cell transplantation model using pregnant pigs. Transplantation of human CB cells into pig fetuses aged <52 days post coitus resulted in a good engraftment rate. Although most of them were micro-chimerism, in some cases, human hematopoietic cells including CD34+ HSPCs were detectable also by FACS in PB and BM. Based on this transplantation model, we attempted in utero cell transplantation into monkey fetus for 4 times. Cells transplanted were human cord blood CD34+ cells, human T cells, human leukemic cells, and GFP transduced-monkey cord blood T cells. The transplantation process itself went smoothly as in a pig model. However, despite successful in utero cell transplantation, chimerism by the human cells was low or hardly detectable in the new born. GFP protein that we used for marking donor cells may be either antigenic or toxic. We need to accumulate more data before the application of in utero cell/gene transfer in the clinical settings.

我们最初使用怀孕猪开发了子宫内细胞移植模型。将人类 CB 细胞移植到性交后 52 天以下的猪胎儿中，获得了良好的植入率。尽管其中大多数是微嵌合体，但在某些情况下，通过 FACS 在 PB 和 BM 中也可检测到包括 CD34+ HSPC 在内的人类造血细胞。基于此移植模型，我们尝试了4次将子宫细胞移植到猴胎儿体内。移植的细胞为人脐带血CD34+细胞、人T细胞、人白血病细胞和GFP转导的猴脐带血T细胞。移植过程本身就像猪模型一样顺利。然而，尽管子宫细胞移植取得了成功，但人类细胞的嵌合性在新生儿中很低或几乎检测不到。我们用于标记供体细胞的 GFP 蛋白可能具有抗原性或毒性。在子宫内细胞/基因转移应用于临床之前，我们需要积累更多的数据。

项目成果

期刊论文数量（36）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kaneko S., et al.: "Simplified Retroviral Vector GCSap with Murine Stem Cell Virus Long Terminal Repeat Allows High and Continued Expression of Enhanced Green Fluorescent Protein by Human Hematopoietic Progenitors Engrafted in Nonobese Diabetic/Severe Com

Kaneko S. 等人：“带有鼠干细胞病毒长末端重复序列的简化逆转录病毒载体 GCSap 允许植入非肥胖糖尿病/重度糖尿病患者的人类造血祖细胞持续高表达增强型绿色荧光蛋白

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Sousuke Miyoshi, Tsutomu Motohashi, Yukio Nakamura, Mitsujiro Osawa, Takashi Hiroyama, Dong-Ku Kim, Yasuhito Tokumoto, Hiromitsu Nakauchi: "A transmembrane trap method for efficient cloning of genes encoding proteins possessing transmembrane domain."Bioch

Sousuke Miyoshi、Tsutomu Motohashi、Yukio Nakamura、Mitsujiro Osawa、Takashi Hiroyama、Dong-Ku Kim、Yasuhito Tokumoto、Hiromitsu Nakauchi：“一种跨膜捕获方法，用于有效克隆编码具有跨膜结构域的蛋白质的基因。”Bioch

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Mitsujiro Osawa^*, Sousuke Miyoshi^*, Neal G. Copeland, Debra J. Gilbert, Nancy A, Jenkins, Takashi Hiroyama, Tsutomu Motohashi, Yukio Nakamura, Atsushi Iwama, Hiromitsu Nakauchi, (*These two authors contributed equally to this work.): "Characterization o

Mitsujiro Osawa^*、Sousuke Miyoshi^*、Neal G. Copeland、Debra J. Gilbert、Nancy A、Jenkins、Takashi Hiroyama、Tsutomu Motohashi、Yukio Nakamura、Atsushi Iwama、Hiromitsu Nakauchi，（*这两位作者对这项工作做出了同等贡献