NK細胞の標的認識に関与する新規C型レクチンの同定とその機能解析

一种参与NK细胞靶标识别的新型C型凝集素的鉴定及其功能分析

基本信息

批准号：
11159221
负责人：
反町典子
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

NK細胞は抗原の感作なしに腫瘍細胞やウイルス感染細胞を殺傷することのできるリンパ球集団で、免疫監視機能に重要な役割を果たしていると考えられている。本研究ではNK細胞の標的認識に関与する新規C型レクチンの同定を目的として研究を行った。その結果、NK細胞分化の初期に選択的に発現する新規Ly-49の遺伝子クローニングに成功し、その性状解析を行った。胎児肝臓内NK細胞におけるNKレセプターの発現を解析する過程で、胎児肝細胞内NK細胞にC型レクチンファミリーに属するLy-49様分子が発現することを見いだした。この分子の性状およびNK細胞における機能を明らかにするために、胎児肝NK細胞に発現するLy-49分子群の遺伝子クローニングを試みた。その結果、Ly-49ファミリーに属する新規メンバーを同定し、Ly-49Qと命名した。Ly-49Qは細胞内領域にITIMモチーフを有することから、抑制性レセプターとして機能することが示唆された。半定量的PCR解析の結果、Ly-49QのmRNAは出生までに次第に減少し、成熟NK細胞においてはその発現量は極めて少なくなる。これは、生後に発現が始まる既知のLy-49分子とは異なるユニークな動態である。このことから、Ly-49Qは胎児肝臓内でのNK細胞の分化あるいは妊娠期間中の母子相互作用に何らかの役割を果たしている可能性が考えられる。現在その機能解析のために、特異的モノクローナル抗体の作成、認識分子の同定を進めている。また、私たちは、Ly-49ファミリーの一員を認識すると思われる新規モノクローナル抗体およびC型レクチンファミリーに属するNKレセプターであるCD94に対するモノクローナル抗体を樹立した。これらの抗体を用いてNK細胞機能におけるC型レクチンファミリーに属する分子群の機能解析を進めている。

NK细胞是淋巴细胞群体，可以杀死肿瘤细胞和感染病毒的细胞而无需抗原敏化，并被认为在免疫监测功能中起重要作用。进行这项研究的目的是鉴定参与NK细胞靶标识别的新型C型凝集素。结果，我们成功克隆了新型LY-49，该新型LY-49在NK细胞分化的早期阶段有选择地表达，并分析了其特性。在分析胎儿肝脏NK细胞中NK受体表达的过程中，我们发现属于C型凝集素家族的LY-49样分子在胎儿肝NK细胞中表达。为了阐明该分子及其在NK细胞中的功能的特性，我们试图克隆在胎儿肝NK细胞中表达的LY-49分子的基因。结果，确定了属于LY-49家族的新成员并命名为LY-49Q。 LY-49Q在细胞内区域具有ITIM基序，表明它充当抑制受体。由于半定量PCR分析，LY-49Q mRNA逐渐逐渐降低，其表达水平在成熟的NK细胞中极低。这是一种独特的动态，与出生后开始表达的已知LY-49分子不同。这表明LY-49Q可能在胎儿肝脏中NK细胞的分化或妊娠期间的母体和儿童相互作用中起作用。目前，为了进行功能分析，我们正在创建特定的单克隆抗体和识别分子的鉴定。我们还建立了一种新型的单克隆抗体，该抗体似乎识别了LY-49家族的成员和一种针对CD94的单克隆抗体，CD94是一种属于C-Type lectin家族的NK受体。使用这些抗体，进行了NK细胞功能中属于C型凝集素家族的分子的功能分析。