Bcl-2ファミリー分子による生殖細胞の腫瘍化および増殖・分化の制御

Bcl-2 家族分子对生殖细胞肿瘤发生、增殖和分化的调节

基本信息

批准号：
11139281
负责人：
松居靖久
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11139281/
关键词：
Bcl-2 p53 精原細胞アポトーシス細胞増殖

项目摘要

本研究では、胎仔生殖細胞および精原細胞の細胞の生死、増殖の制御における、Bcl-2およびp53の役割を解明することを目的に、これら遺伝子を操作したマウスの生殖細胞の性質を解析した。まず、Bcl-2を過剰発現したトランスジェニックマウスの精原細胞を正常な精子形成環境をもつ精巣に移植することにより、精原細胞自身で発現したBcl-2がこの細胞に内在する機構を介して、その細胞死と増殖を抑制する働きがあることを明らかにした。また、精原細胞で機能するBcl-2関連遺伝子を同定することをめざして、これまでに報告された16種類の関連遺伝子の精巣での発現を調べたところ、全ての発現が検出され多くのBcl-2関連遺伝子が精原細胞で機能していることが示唆された。一方、胎仔生殖細胞の細胞死におけるp53の働きを明らかにする目的で、まず胎仔生殖巣でのその発現を調べたところ、16.5日胚以降の精巣で特異的に発現していることを見い出した。さらに、p53ノックアウトマウスと正常マウスで細胞死を起こしている生殖細胞数をTUNEL法により比較したところ、p53の発現パターンに対応し、卵巣および16.5日胚までの精巣では差はなかったが、それ以降の精巣では正常マウスではノックアウトマウスにくらべて細胞死を起こしている生殖細胞が2.5倍程度多く、この時期特異的にp53が関与する機構により細胞死が誘導されることが明らかになった。また、生殖細胞腫瘍のモデル動物を作ることをめざして、ともに生殖細胞の細胞死が抑制させるBcl-2トランスジェニックマウスとp53ノックアウトマウスと交配したが、得られたマウスではBcl-2トランスジェニックマウスの精巣と同様の表現形を示し、また精巣内に腫瘍を形成することはなかった。

在这项研究中，我们分析了已经设计了这些基因的小鼠中生殖细胞的特性，目的是阐明Bcl-2和p53在调节生与死以及胎儿生殖细胞和精子细胞的增殖中的作用。首先，通过从过表达BCl-2的转基因小鼠中移植精子生成环境中的睾丸的精子细胞，可以发现，由精子细胞本身表达的Bcl-2具有抑制细胞死亡和通过这些细胞中固有的机制抑制细胞死亡的功能。此外，为了鉴定精子中起作用的Bcl-2相关基因，我们研究了到目前为止报道的睾丸中16个相关基因的表达，并检测到所有表达式，表明许多与Bcl-2相关的基因在精子中起作用。另一方面，为了阐明p53在胎儿生殖细胞中细胞死亡中的功能，当首次检查其在胎儿性腺中的表达时，发现它在胚胎16.5天后在睾丸中特异性表达。此外，当使用TUNEL方法比较p53敲除小鼠和正常小鼠的生殖细胞数量时，发现p53的表达模式在卵巢和睾丸中没有差异，长达16.5天，但在此期间，在该细胞死亡中的生殖细胞的含量大约为2.5倍，并且在p鼠死亡中的生殖细胞的含量大约为2.5倍。此外，为了为生殖细胞肿瘤创建模型动物，均与Bcl-2转基因小鼠和p53敲除小鼠配合，这些小鼠被生殖细胞死亡抑制，但所获得的小鼠表现出与Bcl-2转基因小鼠的睾丸相似的表型，并且在验证中没有形成肿瘤。