細胞表層に存在する新規ヌクレオチド代謝酵素の生理的役割の解明

阐明细胞表面新型核苷酸代谢酶的生理作用

基本信息

批准号：
10878103
负责人：
堅田利明
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878103/
关键词：
リンパ球 CD38 エクト型酵素 NADアーゼレチノイン酸 PC-1 ホスホジエステラーゼ

项目摘要

申請者の研究グループは、レチノイン酸によるヒトHL-60細胞の好中球への分化過程でエクト型NAD分解酵素 (NADase) が細胞表層に誘導され、この酵素活性がリンパ球表面抗原のCD38によることを先に明らかにした。本研究では、細胞表層上の新しい機能分子と期待されるCD38及びその関連分子PC-1に関わる細胞内シグナル伝達機構、酵素化学的特性、及び転写制御機構などを検討し、以下の知見を得た。1、CD38の基質特異性について検討し、CD38はNAD以外に多様な化合物のN-グリコシド結合を切断し、ニコチンアミドを遊離する特性を示した。2、ラットCD38を認識するポリクローナル抗体を用いた解析から、CD38はアストロ細胞に強く発現することを見出した。また、アストロ細胞表層のCD38は酵素反応の進行にともない何らかの化学修飾を受けて不活性化された。3、CD38の反応産物のADP-riboseは、老化への関与が指摘されている翻訳御修飾であるadvanced glycation end products(AGE)化のよい供与体となることが示された。4、糖鎖修飾を受けたCD38と結合する50-kDaタンパク質をリンパ組織に見出した。5、ヒトCD38遺伝子の遺伝子発現について解析し、核内レチノイン酸受容体のRAR(α)/RXRが結合する応答配列が第1イントロン上に存在することを見出した。6、構造上CD38に類似したPC-1にはホスホジエステラーゼ活性が存在するが、Jurkat Tリンパ球細胞をdibutyryl cAMPで処理すると、膜結合型の発現に加えて可溶性型のPC-1が分泌された。7、膜貫通型および分泌型PC-1の酵素学的な性状に差異はなく、両酵素はPC-1 mRNAの翻訳産物から異なるプロセッシングによって生じる可能性が示された。

在申请人的研究组中，在人类HL-60细胞分化为细胞HL-60细胞上的中性粒细胞中，ECT型NAD酶（NADase）被诱导到细胞表面层，并且该酶活性基于在淋巴球面抗原的CD38上。在这项研究中，我们将检查CD38，该CD38预计将是细胞表面层上的新功能分子，以及与相关分子PC-1和相关的分子PC-1和相关的细胞间信号传递机制，酶化学特性和转录控制机制获取以下知识。 1。考虑到CD38的底物特异性，CD38显示了切割尼古丁酰胺的特征，除了NAD之外，切割了各种化合物的N-糖苷键。 2。使用多克隆抗体识别大鼠CD38的分析发现CD38在Astro细胞中强烈表达。此外，由于酶反应的进展，Astro细胞表面层的CD38接受了一些化学修饰后，无效。 3。ADP-核糖是CD38的反应性产物，已被证明是高级糖基化终产物（年龄）Ization的良好捐助者，这是一种翻译修饰符，已在衰老中指出。 4。在淋巴组织中发现了一种与CD38接收糖链结合的50 kDa蛋白。 5。分析了人CD38基因的基因的表达，发现RAR（α）/RXR的响应序列是核视网膜酸接受的，是第1个内含子上存在的。 6。与CD38相似的PC-1具有磷酸二酯酶活性，但是当Jurkat T淋巴细胞细胞用脱氨基丙烯酸cAMP处理时，除了表达膜组合类型外，还要分泌可溶性PC-1。 7。膜穿透和分泌的PC-1的酶促性能没有差异，这表明双酶可能是由于PC-1 mRNA翻译产物的不同处理可能引起的。