CD38を介する情報伝達機構の解析

CD38介导的信息传递机制分析

基本信息

批准号：
09771966
负责人：
星野真一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771966/
关键词：
リンパ球 CD38 エクト型酵素 NADアーゼレチノイン酸 PC-1 ホスホジエステラーゼ

项目摘要

先に申請者の研究グループは、レチノイン酸によるヒトHL-60細胞の好中球への分化過程でエクト型NAD分解酵素(NADase)が細胞表層に誘導され、この酵素活性がリンパ球表面抗原のCD38によることを明らかにした。本研究では、細胞表層上の新しい機能分子と期待されるCD38及びその関連分子に関わる細胞内シグナル伝達機構、酵素化学的特性、及び転写制御機構などを検討し、以下の知見を得た。1、CD38の基質特異性について検討し、CD38はNAD以外に、ニコチンアミドを有するNMNなどの多様な化合物のN-グリコシド結合を切断することが示された。2、ラットCD38を認識するポリクローナル抗体を作製して中枢組織での局在を解析した結果、CD38はアストロ細胞に強く発現していた。さらに共焦点レーザー顕微鏡を用いた観察から、細胞表層のCD38は酵素反応の進行にともない何らかの化学修飾を受けて不活性化されることが明らかにされた。3、CD38の反応産物のADP-riboseは、老化への関与が指摘されている翻訳御修飾であるadvanced glycation end products(AGE)化のよい供与体となることが示された。4、糖鎖修飾を受けたCD38と結合する50-kDaタンパク質をリンパ組織に同定し、CD38のNADase活性がレクチンとの結合により阻害されることを見出した。5、ヒトCD38遺伝子の遺伝子発現について解析し、核内レチノイン酸受容体のRAR(α)/RXRが結合する応答配列が第1イントロン上に存在することを見出した。6、構造上CD38に類似したPC-1にはホスホジエステラーゼ活性が存在するが、PC-1 mRNAの翻訳産物から異なるプロセッシングによって、膜貫通型および分泌型酵素が産生する可能性が示された。

申请人的研究小组此前发现，在人HL-60细胞被视黄酸分化为中性粒细胞的过程中，细胞表面会诱导产生胞外NAD降解酶（NADase），而这种酶活性负责淋巴细胞表面的产生。结果表明，这是由CD38引起的。在本研究中，我们研究了与CD38及其相关分子相关的细胞内信号转导机制、酶化学性质和转录控制机制，CD38有望成为细胞表面的新功能分子，并获得以下发现。 1. 研究了CD38的底物特异性，结果表明CD38可以裂解各种化合物的N-糖苷键，例如除了NAD之外还含有烟酰胺的NMN。 2.制备识别大鼠CD38的多克隆抗体并分析其在中央组织中的定位，结果发现CD38在星形细胞中强烈表达。此外，使用共焦激光显微镜的观察表明，细胞表面的 CD38 经历了一些化学修饰，并随着酶促反应的进行而失活。 3. ADP-核糖是 CD38 的反应产物，被证明是晚期糖基化终末产物 (AGE) 的良好供体，AGE 是一种已被证明与衰老有关的翻译修饰。 4.我们在淋巴组织中鉴定出一种与糖基化CD38结合的50-kDa蛋白，并发现CD38的NADase活性通过与凝集素结合而受到抑制。 5.我们分析了人类CD38基因的基因表达，发现第一个内含子上存在与核视黄酸受体RAR(α)/RXR结合的反应元件。 6. 虽然结构与CD38相似的PC-1具有磷酸二酯酶活性，但研究表明PC-1 mRNA的翻译产物可能通过不同的加工产生跨膜酶和分泌酶。